予後不良骨髄異形成症候群におけるNR4A3のエピジェネティック制御異常の解明

阐明预后不良的骨髓增生异常综合征中 NR4A3 表观遗传调控异常

• 批准号: 26870103
• 负责人: 武藤 朋也
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-26870103/
• 关键词: NR4A3; エピジェネティクス; DNAメチル化

癌抑制遺伝子NR4A3は急性骨髄性白血病においてその発現が低下していると報告されているが、その発現低下のメカニズムは現在のところ解明されていない。エピジェネティック制御異常による癌抑制遺伝子の発現抑制はよく知られており、本研究で着目したNR4A3もエピジェネティック制御異常であるDNA高メチル化が発現抑制の原因になっていると仮説をたて研究を行った。まず、複数の白血病細胞株のNR4A3の発現を確認したところ、予想通り全ての細胞株で健常CD34陽性骨髄単核細胞と比べ、NR4A3の発現が低下していた。次に、NR4A3のプロモーター領域のDNAメチル化状態をDNAバイサルファイトシーケンシング法を用いて評価したところ、予想に反しコントロールと比べて有意なDNAメチル化の異常は確認されなかった。次に、転写開始地点より下流のCpGサイトのDNAメチル化状態を評価したところ、転写開始地点より約5kb下流のCpGサイトでコントロールに比べ高メチル化している部位を同定した。このDNA高メチル化がNR4A3発現低下に関与しているかどうかを評価するために、DNAメチル化阻害剤であるdecitabineを投与した。decitabineの投与により全ての細胞株で細胞増殖抑制効果を認めるとともに、NR4A3の発現抑制解除が認められた。さらに、decitabine投与後の細胞でDNAバイサルファイトシーケンシングを行ったところ、HL60、K562ではDNAの脱メチル化が生じており、NR4A3発現低下におけるDNA高メチル化の関与が示唆された。一方で、TF-1、KASUMI、U937などではdecitabine投与後のDNA脱メチル化は認められなかった。したがって、細胞遺伝学的異常によってNR4A3発現低下のメカニズムは異なっていると推察された。

Cancer suppressor gene NR4A3 is reported to be associated with a lower incidence of acute osteoblastic leukemia. This study aims to investigate the causes of the development and inhibition of cancer suppressor genes in NR4A3 cells. The expression of NR4A3 in multiple leukemia cell lines was confirmed. It was found that the expression of NR4A3 in all leukemia cell lines was lower than that in normal CD34-positive cells. In addition, the NR4A3 gene expression in the DNA gene expression domain was evaluated by the DNA gene expression method, which was expected to be used to identify the abnormal DNA gene expression. Next, write start location, downstream CpG server DNA aggregation status, write start location, downstream CpG server DNA aggregation status, downstream CpG server DNA aggregation status. The high level of DNA degradation in NR4A3 is related to the low level of DNA degradation. Decitabine release and inhibition of cell proliferation in all cell lines The expression of DNAs in cells treated with decitabine and HL60 and K562 was significantly lower than that in cells treated with decitabine. One side, TF-1, KASUMI, U937 <$ The abnormal expression of NR4A3 in cell genetics was detected.

项目成果

Reduced expression of tumor suppressor NR4A3 through aberrant epigenomic modifications in AML

通过异常表观基因组修饰减少 AML 中肿瘤抑制因子 NR4A3 的表达

• 发表时间: 2014
• 作者: Ryoh Shimizu;Tomoya Muto;Chika Kawajiri;Emi Togasaki;Atsuko Yamazaki;Yasumasa Sugita;Shio Sakai;Yusuke Takeda;Naoya Mimura;Masahiro Takeuchi;Chikako Ohwada;Emiko Sakaida;Tohru Iseki;Koutaro Yokote;Atsushi Iwama;Chiaki Nakaseko
• 通讯作者: Chiaki Nakaseko