ヒト乳房外パジェット病におけるp53遺伝子の変更に関するPCR-SSCP

PCR-SSCP 检测人类乳房外佩吉特病 p53 基因改变

• 批准号: 06770636
• 负责人: 山崎 自子
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 1994
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770636/
• 关键词: 乳房外パジェット病; 癌抑制遺伝子; p53; PCR-SSCP解析

当科にて切除された30例以上の乳房外パジェット病患者より得られた、ホルマリン固定パラフィン包埋組織を試料として用いた。まず、フェノール・クロロホルム抽出・エタノール沈殿法により、ゲノムDNAを抽出した。次に、得られたDNAを鋳型とし、p53遺伝子の異常が集中して認められるエクソン4から9と、それに隣接するイントロンを含む領域をはさむように数種類のプライマー対を設定して、PCRを行なった。この増幅されたDNA断片に対し、SSCP法で解析した。まず、p53遺伝子エクソン4内にある塩基配列多型について、ヘテロ接合性の消失の有無を検討したところ、腫瘍部においてヘテロ接合性の消失は認められなかった。また、p53遺伝子エクソン4から9の領域について腫瘍部DNA中に、点突然変異などの構造異常や正常アレルの欠失は認められなかった。今回検索した範囲以外のエクソンもしくはイントロンに構造異常が起こっている可能性は否定できない。しかし、他の悪性腫瘍で集中してみられる範囲に変異を認めないことにより、ヒト乳房外パジェット病の発癌およびその進展様式において、p53遺伝子が単独で果たす役割はきわめて少ないと考えられた。

More than 30 cases of breast cancer were resected, and the embedded tissue samples were used.まず、フェノール·クロロホルム抽出·エタノール沈殿法により、ゲノムDNAを抽出した。P53 gene abnormalities are concentrated in the following regions: P4, P5, P6, P7, P8, P9, P The DNA fragments were analyzed by SSCP method. The p53 gene was found in the p53 gene, and the p53 gene was found in the p53 gene. The p53 gene was detected in the 4 - 9 region of the tumor DNA. The site suddenly changed. The structure was abnormal. The normal site was not recognized. The possibility of structural anomaly is negative. In addition, there are many different types of breast cancer, such as breast cancer, breast cancer and breast cancer.