Transkriptionelle Regulatoren der peripheren Nervenregeneration

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Der stereotypen Regenerationsantwort nach Axotomie peripherer Nerven liegt die koordinierte Expression spezifischer Gene zugrunde. Über die regulatorischen Faktoren, die an der transkriptionellen Steuerung von Reparaturprozessen im PNS beteiligt sind, ist jedoch wenig bekannt. In der laufenden Förderperiode wurden durch geeignete PCR-Verfahren mit degenerierten Oligonukleotidprimern 17 Transkriptionsfaktoren aus verschiedenen Genfamilien identifiziert und deren differenziell regulierte Expression nach Nervenläsion und während der Regeneration im Ischiasnerv der Ratte studiert. In der kommenden Antragsperiode wollen wir uns auf die Charakterisierung eines Transkriptionsfaktors aus der Gruppe der bHLH-Proteine, Mash2 (Mammalian achaete-scute homologue), und die Homeoboxproteine HoxA6(r), HoxB5 und HoxD3 konzentrieren, deren Funktion im adulten Nervensystem und bei neuralen Reparaturprozessen nicht bekannt ist. Wir wollen (a) die genexprimierenden Zellen im intakten, verletzten und regenerierenden peripheren Nerv identifizieren (in situ-Hybridisierung, Immuncytochemie), (b) diese Gene in transfizierten Schwannzellen überexprimieren, um (c) durch Hybridisierung von DNA-Array Filtern mit cDNA-Pools aus transfizierten vs nichttransfizierten Zellen Hinweise auf potentielle Zielgene dieser Transkriptionsfaktoren zu erhalten und (d) durch Untersuchung des Zellverhaltens hinsichtlich Veränderungen in Morphologie, Proliferation, Migration, Zelladhäsion oder Apoptosereaktion erste Einblicke in die zellbiologische Funktion der genannten Transkriptionsfaktoren zu gewinnen.