Molekulargenetische Charakterisierung des Eisen-Phytosiderophor-Transports in Gramineen

Zur Aneignung von Eisen(Fe)geben Graminen Gratosideropore(PS)ab and nehmen Fe(III)-PSüber ein postuliertes TransportProtein in der Wurzelmean auf.Zil des Projekts Sind die Isolierung der Gin and die Molekulare Des Fe-PS-Transportan der Primmam an von Maiswurzeln.他说：“这是一件很重要的事情，因为这是一件很重要的事情。在Vorversuhen Wurden Nachkommen Aus einer Kreuzung von ys1 MIT einer转座-Ativen Maislinie(变种人)“gescreent”。这句话的意思是：“如果你是一名变性人，那么你就是我的朋友。”对YS1亚型中的Mu-转座子插入和XS1-flankierenden RFLP-Markern soll das进行了分析。在此基础上，提出了一种新的解决方案-.Füreinen FunktionSnachweis Sollen die YS-gene in Wildtyp-mais and in den ys-Mutantenüberexpriert等。另一种选择是，铁-多酚运输工具实现了这一点。Ausgewählte Hefestämme Sollen MIT einer，在DEM PS BZW.Fe-komplexierte PS Einzige Stickstoff-Quelle VerfüGBar Sind中，表达了BANK Transform iert and Auf N-Mangel-Medium Ausgewählte Hefestämme Sollen MIT einer cdna-Expressionsbank Transformiert and auf N-Mangel-Medium auPlattiert，DEM PS BZW.Fe-komplexierte PS Einzige Stickstoff-Quelle VerfüGBar Sind。基因Aus beiden ansätzen Sollen in Hefe and Xenopus-Ocyten Expriert and die Transportigenschaften Hefe and Xenopus-Ocyten Exmiert and Die Transportigenschaften is hrer Proteine Analysiert.

Zur Aneignung von Eisen (Fe) geben Gramineen Phytosiderophore (PS) ab und nehmen Fe(III)-PS über ein postuliertes Transportprotein in der Wurzelmembran auf. Ziel des Projekts sind die Isolierung der Gene und die molekulare Charakterisierung des Fe-PS-Transports an der Plasmamembran von Maiswurzeln. Da die Gelbstreifigkeit der Maismutante ys1 auf einem Defekt in der Aufnahme von Fe-PS beruht, soll das ys1-Gen über TransposonTagging isoliert werden. In Vorversuchen wurden Nachkommen aus einer Kreuzung von ys1 mit einer Transposon-aktiven Maislinie (Mutator) "gescreent". Eine Pflanze, die den Phänotyp der ys1Mutante zeigte, wurde selektiert und geselbstet. Über Rückkreuzungen und Kopplungsanalyse zwischen Mu-Transposon-Insertionen und xs1-flankierenden RFLP-Markern soll das in YS1 inserierte Mu-Transposon identifiziert und das YS1-Gen sequenziert werden. Parallel soll der gleiche Ansatz mit der ys3-Mutante durchgeführt werden, deren gelbstreifiger Phänotyp auch durch Fe-Düngung behoben werden kann. Für einen Funktionsnachweis sollen die YS-Gene in Wildtyp-Mais und in den ys-Mutanten überexprimiert werden. Alternativ dazu soll versucht werden, Fe-PSTransporter über Hefekomplementation zu isolieren. Ausgewählte Hefestämme sollen mit einer cDNA-Expressionsbank transformiert und auf N-Mangel-Medium ausplattiert werden, in dem PS bzw. Fe-komplexierte PS als einzige Stickstoff-Quelle verfügbar sind. Gene aus beiden Ansätzen sollen in Hefe und Xenopus-Oocyten exprimiert und die Transporteigenschaften ihrer Proteine analysiert werden.