Potenz und molekulare Grundlagen des Nachweises von Genomschädigungen über "single cell gelelectrophoresis" (Comet-assay) bei Pflanzen

使用“单细胞凝胶电泳”(彗星测定)检测植物基因组损伤的效力和分子基础

基本信息

项目摘要

Für 3 Varianten des Comet-assay wurden an isolierten Zellkernen von Vicia faba reproduzierbare Bedingungen mit niedrigen Kontrollwerten erarbeitet und die jeweils erfaßten Läsionstypen untersucht. Zellzyklusphasen wurden vergleichend getestet und Dosiswirkungskurven erstellt. In Kombination mit der in situ Hybridisierung wurde der Schädigungsgrad spezifischer Chromatindomänen erfaßt und mit der chromosomalen Verteilung anderer Endpunkte der Genotoxineinwirkung verglichen (s.2.2).Darauf aufbauend soll die Methodik auf Arabidopsis übertragen werden. Für 5 Mutagene unterschiedlicher Genotoxinklassen sollen Dosiswirkungsbeziehungen und Reparationskinetik von Cometassay nachweisbaren DNA-Schäden untersucht werden. Parallel soll der Kleinkerntest für Arabidopsis etabliert werden, um unter vergleichbaren Behandlungsbedingungen auch Chromosomenaberrationen als Endpunkte der Genotoxineinwirkung messen zu können. Der angestrebte Datensatz dient als Voraussetzung für ein Projekt zur möglichst vollständigen Erfassung und Charakterisierung aller an der Abwehr von genotoxischem Stress beteiligten Gene und deren Expressionsmuster für eine Höherer Pflanze.
Für 3 Varianten des Comet-assay wurden an isolierten Zellkernen von Vicia faba reproduzierbare Bedingungen mit niedrigen Kontrollwerten erarbeitet and die jeweils erfaßten Läsionstypen untersucht. Zellzyklusphasen wurden vergleichend getestet and Dosiswirkungskurven erstelt.在原位杂交中,将特异性的染色体片段与染色体畸变和遗传毒素抑制的末端位点结合(s.2.2),在拟南芥韦尔登中建立方法。对于5个致突变基因的遗传毒性,需要通过DNA测序韦尔登来确定彗星试验的剂量和修复机制。平行求解拟南芥的Kleinkerntest,可获得韦尔登,在遗传毒素抑制作用的终点,可获得染色体畸变。Der angestrebte Dateneficient als Voraussetzung für ein Projekt zur möglichst vollständigen Erfassung und Charakterisierung阿勒an der Abwehr von genotoxischem Stress beteiligten Gene und deren Expressionsmuster für eine Höherer Pflanze.

项目成果

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