Strukturaufklärung, supramolekulare Assoziation und molekulare Immunerkennung von Zelloberflächenproteinen mit massenspektrometrischen Methoden

使用质谱方法对细胞表面蛋白进行结构解析、超分子缔合和分子免疫识别

• 批准号: 5175134
• 负责人: Professor Dr. Michael Przybylski, Ph.D. (†)
• 金额: --
• 依托单位: Steinbeis-Transferzentrum Biopolymeranalytik und Biomedizinische Massenspektrometrie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Units
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1994-12-31 至 2001-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5175134?language=en
• 关键词: Strukturaufkl; rung; supramolekulare; Assoziation; und

Zielsetzungen des vorliegenden Vorhabens sind die Isolierung, vollständige Primärstrukturaufklärung und Identifizierung molekularer Interaktionspartner von Zelloberflächenproteinen mit wesentlichen Funktionen von Zellkommunikation und Axonwachstum. Insbesondere sollen die für diese Funktionen wichtigen Strukturmodifikationen (Glykosilierung, Disulfidbrücken, Phosphorylierung, Lipidmodifizierung) an natürlichen und rekombinanten Proteinen aufgeklärt werden. In Kooperation mit Mitgliedern der Forschergruppe werden hierzu chromatographische, neu entwickelte Affinitätsisolierungsverfahren, in Kombination mit hochempfindlichen Methoden der Protein-Massenspektrometrie und proteinchemischen, enzymatischen und spektroskopischen Methoden herangezogen. Massenspektrometrische Methoden sollen zur Identifizierung der Interaktionspartner von Zelloberflächenproteinen (Neurolin, Axonin), von Bindungsdomänen und Epitopstruktur (Reggie, Matrix-Metalloproteinase) durch (a) direkte Nano-ESI-Massenspektrometrie, (b) Kombination von 2D-Gelelektrophorese und MALDI-MS-peptide mapping, (c) massenspektrometrische Epitop-mapping-Analyse angewendet werden. Zur direkten Analyse von Proteinantigen-Interaktionspartnern/Liganden aus biologischem Material soll ein vor kurzem neu entwickeltes Verfahren (massenspektrometrische Affinitäts-Proteomanalyse) herangezogen werden.

Zielsetzungen des vorliegenden Vorhabens sind die Isolierung，vollständige Primärstrukturaufklärung und Identifizierung molekularer Interaktionspartner von Zelloberflächenproteinen mit wesentlichen Funktionen von Zellkomparkation und Axonwachstum. Insbesondere sollen die für diese Funktionen wichtigen Strukturmodifikationen（Glykosilierung，Disulfidbrücken，Phosphorylierung，Lipidmodifizierung）an natürlichen und rekombinanten Proteinen aufgeklärt韦尔登.在与高级韦尔登的合作中，新的亲和层析法，在与蛋白质质谱法和蛋白质化学、酶法和分光光度法的结合中。质谱方法通过（a）直接Nano-ESI-质谱法，（B）二维凝胶电泳和MALDI-MS-肽图谱的结合，（c）质谱表位图谱-分析韦尔登，来鉴别Zelloberflächenproteinen（Neurolin，Axonin）、Bindungsdomänen和Epitopstruktur（Reggie，Matrix-Metalloproteinase）的相互作用。从生物学材料中直接分析蛋白抗原-相互作用伙伴/配体，以获得新的蛋白质（质谱亲和-蛋白质组分析）。