Untersuchung des molekularen Mechanismus der schnellen O2-abhängigen Regulation der DNA-Replikation in Säugerzellen am Modell der SV40-Replikation in vivo

使用SV40体内复制模型研究哺乳动物细胞中DNA复制快速O2依赖性调节的分子机制

• 批准号: 5176924
• 负责人: Professor Dr. Hansgeorg Probst
• 金额: --
• 依托单位: Interfakultäres Institut für Biochemie (IFIB)
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1993-12-31 至 2001-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5176924?language=en
• 关键词: Untersuchung; des; molekularen; Mechanismus; der

Proliferierende Säugetierzellen können auf ungünstige Versorgungs- und Stoffwechselbedingungen, insbesondere Hypoxie, mit einer schnellen und leicht reversiblen Herunterregulation der DNA-Replikation antworten. Dadurch können Stoffwechselkatastrophen und Apoptose-Induktion vermieden werden. U.a. werden dabei Replikon-Initiation in einem definierten Zustand arretiert, auch beobachtbar bei der in vivo-Replikation der DNA von Simian Virus 40 (SV40). Am SV40-Modell sollen (a) der regulatorische Weg der schnellen Replikationsregulation und (b) die molekularen Mechanismen der Replikon-Initiation, wie sie in vivo realisiert sind, weiter erforscht werden. Es ist geplant, mit Hilfe der 2D-Elektrophorese nach schnellen, d.h. innerhalb weniger Minuten nach relevanten pO2-Änderungen auftretenden, Änderungen des "Miniproteoms" der SV40-Minichromosomen zu suchen. Auf die Bedeutung möglicher Zielsequenzen für die Bindung regulatorischer Proteinen im SV40-Genom zielen Studien mit abgewandelten Ursprungs-flankierenden Regionen. Mit Hilfe der Kleinmolekülspezifischen Permeabilisierung SV40-replizierender Zellen durch a-Toxin aus S. aureus soll nach einem vermuteten, an der Regulation beteiligen niedermolekularen Faktor gesucht werden und der Metabolismus von Primer-RNA/DNA bei der Initiation studiert werden.

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