分子シャペロンによるDNA複製開始蛋白質(RepE)の構造変換桟構

分子伴侣对 DNA 复制起始蛋白 (RepE) 的结构转化

• 批准号: 08680741
• 负责人: 和田 千恵子
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08680741/
• 关键词: ミニFプラスミド; RepE蛋白質; 二量体形成ドメイン; 分子シャペロン

ミニFプラスミドのDNA複製調節に重要な役割を担っている複製開始蛋白質(RepE)は少なくとも2つの機能を持ち、複製開始因子として、また自己転写抑制因子として働く。これらの二つの機能はRepE蛋白質の異なった形態によって担われている。すなわちRepE単量体はoriginに結合し複製開始因子として、RepE二量体はrepE遺伝子のオペレーターに結合して自己転写抑制因子として働く。このRepE二量体から単量体への変換はori2イテロンがなくても分子シャペロン(DnaK,DnaJ,ATP又はDnaK,DnaJ,GrpE,ATP)によって行われる事、又これらのどの1つを欠いてもこの変換は進まないことをin vitroの実験から明らかにした。またこれらの分子機構を理解するうえでRepE蛋白質のドメイン構造の解析は欠かせない。二量体形成ドメインを調べるために、自己転写抑制活性を失った変異体を多数分離し、それらの遺伝学的、生化学的手法にとる解析から、二量体形成ドメインはRepEの93〜161アミノ酸領域であることを明らかにした(J.M.B.に投稿予定)。一方で、野生型dnaK,dnaJ変異株でのRepEとDnaK,DnaJ,GrpEとの複合体形成能を調べた。複合体の回収率は野生型株からはきわめて少ないが、dnaK,dnaJの変異株では比較的安定であることがわかった。

The function of replication initiation protein (RepE), which plays an important role in the regulation of DNA replication, is to maintain the function of replication initiation factor and self-expression inhibitor. The two functions of RepE protein are different in morphology. RepE unit origin binding, replication initiation factor, RepE unit origin binding, replication initiation factor, RepE unit origin binding, replication initiation factor, replication initiation factor, and replication initiation factor. The two molecules of RepE change from one molecule to the other (DnaK,DnaJ,ATP and DnaK,DnaJ,GrpE,ATP). To understand the molecular structure of RepE protein, we need to analyze its structure. The molecular structure of the two molecules is regulated by the enzyme, the inhibition activity of the two molecules is lost, the most of the two molecules are separated, the molecular structure of the two molecules is analyzed by the biochemical method, and the molecular structure of the two molecules is formed by the enzyme, and the acid domain of the two molecules is determined by the paper submitted by J.M.B. The complex formation ability of RepE DnaK, DnaJ,GrpE was modulated between wild type and square type dnaK,dnaJ. The rate of recovery of the complex is different from that of wild-type plants.

项目成果

Y.Kawasaki F.Matsunaga Y.Kano,T.Yura,C.Wada: "The localized melting of mini-F origin by the combined action of the mini-F initiator protein(RepE)and HU and DnaA of E coli" Mol Gen Genet. 253. 42-49 (1996)

Y.Kawasaki F.Matsunaga Y.Kano,T.Yura,C.Wada：“通过 mini-F 起始蛋白 (RepE) 与大肠杆菌的 HU 和 DnaA 的联合作用，实现 mini-F 起源的局部熔化” Mol