脳の遺伝子発現を制御するカルシウム/カルモデュリン依存性蛋白質燐酸化酵素

控制大脑基因表达的钙/钙调蛋白依赖性蛋白磷酸酶

• 批准号: 09260201
• 负责人: 藤澤 仁
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Asahikawa Medical College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09260201/
• 关键词: カルシウム; カルモデュリン; 脳; 蛋白質燐酸化酵素; シグナル伝達; 細胞核; アイソフォーム; キナーゼキナーゼカスケード

CaMキナーゼIVは神経細胞の核に局在するカルシウム/カルモデュリン依存性多機能性蛋白質燐酸化酵素であり、転写調節因子CREBを燐酸化して活性化することが報告されている。神経細胞のカルシグナリングによる転写調節はカルシウム/カルモデュリン/キナーゼ/キナーゼカスケードの制御下にあると考えられるのでこの制御機構について研究し、次のような成果を収めた。CaMキナーゼIVは上流のCaMキナーゼキナーゼによって燐酸化されて活性化されるが、この活性発現に関与する燐酸化部位がN末端から196番目のスレオニンであることを燐酸化したCaMキナーゼIVを消化して得たペプチドの解析により明らかにした。CaMキナーゼカスケードの上流のCaMキナーゼキナーゼにアイソフォームが存在することを明らかにし、αアイソフォームに続いてもう1つのβアイソフォームについてもラットの脳より精製し、さらにcDNAをクローニングした。アイソフォームに特異的な抗体を調製し、抗体を用いてそれぞれのアイソフォームの脳内部位分布を調べ、比較した。CaMキナーゼキナーゼαの組み換え型酵素を用いてその性質を調べ、酵素がCaMキナーゼIVのスレオニン196とCaMキナーゼIのスレオニン177を特異的に燐酸化することを明らかにし、厳密な基質特異性をもつことを示した。CaMキナーゼIVがカルシウム/カルモデュリンによってCaMキナーゼキナーゼ低感受性型の酵素に変換することを見出し、CaMキナーゼカスケードの新しい制御機構の可能性を示した。

CaM is a multifunctional protein phosphorylase dependent on the activation of CREB in the nuclear system of neurons. The regulation of neurocellular regulation is the result of research and development of regulatory mechanisms. CaM phosphorylation is related to the activation of CaM in the upper stream. The phosphorylation site is located at the N-terminal of CaM. The CaM gene expression in the upstream CaM gene expression in the upstream CaM gene expression The distribution of specific antibodies in different parts of the body was modulated and compared. CaM is the enzyme that modulates the properties of CaM and CaM. CaM is the enzyme that modulates the properties of CaM and CaM. The possibility of a new control mechanism for CaM in the presence of CaM in the presence of low susceptibility enzymes was demonstrated.

项目成果

奥野 幸子: "ブレインサイエンス最前線'98" 講談社, 11 (1997)

奥野幸子：《脑科学前线98》讲谈社，11（1997）

S.Okuno: "Purification and Characterization of Ca^<2+>/Calmodulin-Dependent Protein Kinase Kinase β from Rat Cerebellum" J.Biochem. 121(1). 155-160 (1997)

S.Okuno：“来自大鼠小脑的Ca 2+ /钙调蛋白依赖性蛋白激酶激酶β的纯化和表征”J.Biochem.121(1)(1997)。

I.Kameshita: "Detection of Calcium Binding Proteins by Two-Dimensional Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis" Anal.Biochem. 249. 252-255 (1997)

I.Kameshita：“通过二维十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测钙结合蛋白”Anal.Biochem。

S.Okuno: "Studies on the Substrate Specificity of Ca^<2+>/Calmodulin-Dependent Protein Kinase Kinase α" J.Biochem. 122. 337-343 (1997)

S.Okuno：“Ca^2+/钙调蛋白依赖性蛋白激酶激酶α的底物特异性的研究”J.Biochem. 122. 337-343 (1997)

Y.Hayashi: "Calcium-and calmodulin-dependent Phosphorylation of AMPA type glutamate receptor subunits by endogenous protein kinases in the post-synaptic density" Mol.Brain Res. 46. 338-342 (1997)

Y.Hayashi：“突触后密度中内源性蛋白激酶对 AMPA 型谷氨酸受体亚基的钙和钙调蛋白依赖性磷酸化”Mol.Brain Res。