Anwendung der Massenspektrometrie zur Identifizierung der Genprodukte von Mycoplasma pneumoniae

应用质谱技术鉴定肺炎支原体基因产物

基本信息

项目摘要

Wie reguliert eine Zelle die Expression der Gesamtheit aller Gene und wie reagiert sie dabei auf veränderte Wachtumsbedingungen? Dieses Problem untersuchen wir auf der Ebene der Translation an dem Bakterium Mycoplasma pneumoniae. Dieses ist wegen seiner reduzierten Genomgröße (816 kBp) und der vollständig vorliegenden Nukleotidsequenz des Genoms dafür besonders geeignet. Die Grundlage für diese Analyse bildet eine Proteinkarte, in der die Positionen aller Proteine von M. pneumoniae Zellen, die unter Standard-Laborbedingungen gewachsen sind, reproduziebar festgelegt sind. Experimentell werden dafür alle Proteine des Genoms (Proteom) durch zweidimensionale Gelelektrophorese aufgetrennt und mit den Methoden der Massenspektrometrie bezüglich der Größe ihrer tryptischen Peptide und deren Aminosäuresequenzen genau charakterisiert. Durch Ähnlichtkeitsvergleiche mit den von der Nukleotidsequenz des Genoms abgeleiteten Proteindaten kann jedes Protein einem Gen zugerodnet werden; damit erhält man die gewünschte Referenz-Proteinkarte. Durch Vergleich dieser Referenzkarte mit Proteingelen, die von M. pneumoniae Zellen stammen, welche unter veränderten Bedingungen gewachsen sind, kann man im Rahmen aller Proteine sofort jene erkennen, deren Expression einer wachstumsbedingten Kontrolle unterliegen.
如何定期检查Zelle die Expression der gesamit aller Gene和reagert sie dabei auf veränderte Wachtumsbedingungen?本文讨论的问题是:细菌与肺炎支原体之间的关系。Dieses ist wegen seiner reduzierten Genomgröße (816 kBp) and der vollständig vorliegenden Nukleotidsequenz des Genoms datafr beonders geeiget。细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌细菌实验研究了<s:1>等位蛋白基因组(Proteom)的测定方法,测定了蛋白质的维数,测定了色氨酸肽的密度,测定了色氨酸肽的密度,测定了色氨酸的密度,测定了色氨酸的密度,测定了色氨酸的密度,测定了Aminosäuresequenzen基因特征。荷兰荷兰大学Ähnlichtkeitsvergleiche mit den von der Nukleotidsequenz des Genoms abgeleiteten Protein;该死erhält man die gew<e:1>参考蛋白。Durch Vergleich dieser Referenzkarte mit Proteingelen, die von M. pneumoniae Zellen stammen, welche under veränderten Bedingungen gewachsen sind, kann man in Rahmen aller protein sofline genenerkenen, deren Expression iner wachstsbedingten control unterlegen。

项目成果

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