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脊髄一次球心性繊維の標的認識における転写因子DRG-11の役割の解析

转录因子DRG-11在脊髓初级向心纤维目标识别中的作用分析

基本信息

批准号：
09680737
负责人：
志賀隆
金额：
$ 2.05万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09680737/
关键词：
投射路形成標的認識脊髄脊髄神経節転写因子ニワトリ胚

项目摘要

一次求心性線維の脊髄への投射路形成における転写因子DRG-11の役割を解析する第一歩として、ニワトリDRG-11をクローニングした。その結果、ラットDRG-11と比較してopen reading frame のアミノ酸配列が約90%で相同であった。さらに、ホメオドメインは約98%で相同であり、哺乳類と鳥類の間でDRG-11のアミノ酸配列が高度に保存されていることが明かになった。次に、鶏卵3-20日のニワトリ胚脊髄神経節および脊髄におけるDRG-11の発現様式をin situ hybridization 法によって調べた。DRG-11 mRNAは孵卵4日の脊髄神経節で弱いながら発現が見られるようになった。一方、脊鐘や交感神経節では発現は認められなかった。その後、脊髄神経節におけるDRG-11の発現は強まった。特異抗体を用いた免疫組織化学を隣接切片で行うことによって、DRG-11はTrkA陽性およびTrkC陽性の脊髄神経節細胞の両方に発現することが明かになった。一次求心性線維が脊髄灰白質に侵入する孵卵6.5日になると脊髄でもDRG-11の発現が認められるようになった。脊髄における発現は後角に限局し、特に表層部(I、II層)で強い発現が見られた。さらに、脳室層(上衣層)に面した領域で中程度の発現が見られたが、孵卵10日以後、この領域での発現は消失した。このような脊髄神経節および脊髄後角表層部でDRG-11の発現は孵卵20日でも維持されていた。以上のように、一次求心性線維が投射する時期に、脊髄後角表層部に眼局してDRG-11の発現が認められたことは、この転写因子が一次求心性線維の脊髄後角への投射路形成に関与する可能性が示唆された。

The first step in determining the projection path formation of the central line dimension is to write the DRG-11 factor. The results of DRG-11 are about 90% the same as those of the open reading frame. The acid sequence of DRG-11 in mammals and birds is highly conserved. The development of DRG-11 in situ hybridization method is regulated by 3-20 days of incubation. DRG-11 mRNA was detected in the spinal cord of 4 days after incubation. A side, spine bell and sympathetic nerve section are not recognized. The DRG-11 was developed after a long period of time. Specific antibodies were used in immunohistochemical staining of adjacent sections. DRG-11 and TrkA-positive spinal ganglion cells were detected. The first time to find the center line dimension, the ridge line invasion, the incubation of 6.5 days, the ridge line DRG-11 discovery, the recognition of the first time. The ridge appears in the rear corner of the ridge, and the surface layer (I and II layers) is strongly visible. In the middle of the egg layer, the egg layer (upper layer) appears and disappears. After 10 days of incubation, the egg layer appears and disappears. The DRG-11 appeared in the dorsal horn of the spinal cord and incubated for 20 days. The above factors indicate the possibility of the formation of projection path of DRG-11 in the surface layer of ridge back angle.