NK細胞の標的認識に関わる新規NKレセプターの同定および性状解析

参与 NK 细胞靶标识别的新型 NK 受体的鉴定和表征

基本信息

批准号：
12213160
负责人：
反町典子
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12213160/
关键词：
NK細胞 CD94 NKレセプターマウス Qa-1 モノクローナル抗体

项目摘要

本研究はNK細胞の標的認識に関わる新規NKレセプターの同定及びその性状解析を目的として行った。これまでにNK細胞に対する種々のモノクローナル抗体を作製し、発現分布、NK細胞傷害活性に与える影響から、新規分子を認識すると考えられる抗体を選別し、性状解析を進めた結果、その中の一つがマウスCD94を認識することを明らかにした。マウスCD94は、そのcDNAは単離されていたものの、特異的な抗体の不足によってマウス個体内における発現分布や実際のNK細胞機能における役割などの解析は進んでいなかった。そこで、得られた抗体を用いてNK細胞の標的認識におけるCD94機能を解析した。その結果、CD94が全てのNKおよびNKT細胞に発現すること、NKおよびNKT細胞はCD94強陽性とCD94弱陽性細胞の2種類の細胞亜集団からなることを見いだした。抗CD94抗体の添加により、本来殺傷しないはずの自己に対する細胞傷害活性が誘導された。さらに非自己に対する細胞傷害活性も増強された。この現象の分子機構を明らかにするために、CD94が認識する標的細胞上の分子の解析を行った結果、マウスCD94は標的細胞上のQa-1分子を認識して細胞傷害活性を抑制する、抑制性レセプターとして機能することが明らかとなった。CD94はヒトにおいて解析が進んでいるが、遺伝的背景が明らかなマウスを用いての解析はNK細胞の自己非自己の識別機構および自己寛容の機構を解析する上で大きな利点があり、必須である。本研究からNK細胞の自己寛容の破綻には少なくとも一種類の抑制性NKレセプターを阻害することでも可能なことが示された。このことは複数の抑制性レセプターを組み合わせることによってさらに強力な自己寛容の破綻を誘導することが可能なことを示唆しており、同時にがん免疫療法への効果的なNK細胞の応用に抗抑制性NKレセプター抗体が導入できるかどうか、その応用に向けての検討の必要性をも強く示唆するものである。

进行这项研究的目的是识别参与NK细胞靶标识别的新型NK受体并分析其特性。我们已经制备了针对NK细胞的各种单克隆抗体，并根据其对表达分布和NK细胞损伤活性的影响识别新分子的选定抗体，并进行了性质分析，结果揭示了其中一个识别小鼠CD94。尽管小鼠CD94的cDNA被分离出来，但由于缺乏特定的抗体，对小鼠个体内表达分布的分析以及实际NK细胞功能中的作用尚未进行。因此，使用获得的抗体分析了NK细胞靶标的CD94功能。结果，我们发现CD94在所有NK和NKT细胞中都表达，并且NK和NKT细胞由两个细胞亚群组成：CD94呈阳性阳性和CD94细胞。抗CD94抗体的添加引起了对自我的细胞毒性活性，不应被杀死。此外，非自我诱导的细胞毒性活性得到了增强。为了阐明该现象的分子机制，我们分析了CD94识别的靶细胞上的分子，并发现小鼠CD94是识别靶细胞上QA-1分子并抑制细胞毒性活性的抑制受体。尽管在人类中对CD94进行了分析，但使用具有清晰遗传背景的小鼠进行分析是必不可少的，并且在分析NK细胞中自我识别和自我耐受性的机制方面具有很大的优势。这项研究表明，可以通过抑制至少一种抑制性NK受体来破坏NK细胞的自我耐受性。这表明，将多种抑制受体结合起来可以诱导更有效的自我耐受性破坏，也强烈表明需要考虑使用抗抑制性NK受体抗体在癌症免疫疗法中的有效NK细胞应用中应用。