NK細胞の標的認識に関わる新規NKレセプターの同定および性状解析

参与 NK 细胞靶标识别的新型 NK 受体的鉴定和表征

• 批准号: 12213160
• 负责人: 反町 典子
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12213160/
• 关键词: NK細胞; CD94; NKレセプター; マウス; Qa-1; モノクローナル抗体

本研究はNK細胞の標的認識に関わる新規NKレセプターの同定及びその性状解析を目的として行った。これまでにNK細胞に対する種々のモノクローナル抗体を作製し、発現分布、NK細胞傷害活性に与える影響から、新規分子を認識すると考えられる抗体を選別し、性状解析を進めた結果、その中の一つがマウスCD94を認識することを明らかにした。マウスCD94は、そのcDNAは単離されていたものの、特異的な抗体の不足によってマウス個体内における発現分布や実際のNK細胞機能における役割などの解析は進んでいなかった。そこで、得られた抗体を用いてNK細胞の標的認識におけるCD94機能を解析した。その結果、CD94が全てのNKおよびNKT細胞に発現すること、NKおよびNKT細胞はCD94強陽性とCD94弱陽性細胞の2種類の細胞亜集団からなることを見いだした。抗CD94抗体の添加により、本来殺傷しないはずの自己に対する細胞傷害活性が誘導された。さらに非自己に対する細胞傷害活性も増強された。この現象の分子機構を明らかにするために、CD94が認識する標的細胞上の分子の解析を行った結果、マウスCD94は標的細胞上のQa-1分子を認識して細胞傷害活性を抑制する、抑制性レセプターとして機能することが明らかとなった。CD94はヒトにおいて解析が進んでいるが、遺伝的背景が明らかなマウスを用いての解析はNK細胞の自己非自己の識別機構および自己寛容の機構を解析する上で大きな利点があり、必須である。本研究からNK細胞の自己寛容の破綻には少なくとも一種類の抑制性NKレセプターを阻害することでも可能なことが示された。このことは複数の抑制性レセプターを組み合わせることによってさらに強力な自己寛容の破綻を誘導することが可能なことを示唆しており、同時にがん免疫療法への効果的なNK細胞の応用に抗抑制性NKレセプター抗体が導入できるかどうか、その応用に向けての検討の必要性をも強く示唆するものである。

This study aimed to identify and characterize NK cell markers. The results of the analysis of NK cells and the identification of CD94 are as follows: (1) the production of NK cell antibodies,(2) the distribution of NK cell injury activity,(3) the identification of new molecules,(4) the selection of antibodies,(5) the analysis of characteristics, and (6) the identification of CD94. Maruus CD94 and its cDNA are isolated from each other, and the lack of specific antibodies has led to the development of distribution and actual NK cell function in Maruus individuals. CD94 function analysis was performed using antibodies against NK cells. The results showed that CD94 cells were all positive for NK and NKT cells, CD94 cells were strongly positive for NK and NKT cells, and CD94 cells were weakly positive for NK. The addition of anti-CD94 antibodies induces cell damaging activity that is inherently lethal but not self-destructive. The activity of non-self-inflicted cell injury was increased. The molecular mechanism of this phenomenon was analyzed by CD94 and the Qa-1 molecule on CD94 target cells was analyzed by CD94 and the cytotoxic activity was inhibited by CD94. CD94 is the most important part of the analysis of NK cell recognition mechanism and its own tolerance mechanism. The present study suggests that there are a number of possible mechanisms for inhibiting NK cell proliferation. This is the first time that multiple inhibitory NK cell combinations have been established, and it is possible to induce strong self-tolerance defects, and it is necessary to strengthen the use of anti-inhibitory NK cell antibodies for immunotherapy.

项目成果

Tagawa,K., et al.: "Myopathy phenotype of transgenic mice expressing active site-mutated inactive p94 skeletal muscle-specific calpain, the gene product responsible for limb girdle muscular dystrophy type 2A."Human Mol.Genet.. 9. 1393-1402 (2000)

Takawa,K. 等人：“表达活性位点突变的失活 p94 骨骼肌特异性钙蛋白酶的转基因小鼠的肌病表型，这是导致 2A 型肢带型肌营养不良症的基因产物。”Human Mol.Genet.. 9. 1393

反町典子: "NK細胞の標的認識とウイルスのエスケープ機構"実験医学 増刊号. (印刷中).

Noriko Sorimachi：“NK 细胞的目标识别和病毒逃逸机制”实验医学特刊（正在出版）。

反町典子: "NK細胞の正と負の標的認識機構"細胞工学 増刊号. 19. 255-262 (2000)

Noriko Sorimachi：“NK 细胞的阳性和阴性靶标识别机制”细胞工程特刊 19. 255-262 (2000)。

Fujimoto,T., et al.: "Chondroitin sulfate proteoglycan aggrecan specifically binds CD44."Int.Immunol.. (In press).

Fujimoto,T., et al.：“硫酸软骨素蛋白聚糖聚集蛋白聚糖特异性结合 CD44。”Int.Immunol..（正在出版）。

Endo,J., et al.: "Deficiency of a STE20/PAK family kinase LOK leads to the acceleration of LFA-1 clustering and cell adhesion of activated lymphocytes."FEBS Letters. 468. 234-238 (2000)

Endo,J. 等人：“STE20/PAK 家族激酶 LOK 的缺陷会导致 LFA-1 聚集和活化淋巴细胞的细胞粘附加速。”FEBS Letters。