分子空間固定型ネガマイシンの標的分子同定と論理的リードスルー創薬への展開

分子空间固定负霉素的靶分子识别和逻辑通读药物发现的开发

基本信息

批准号：
22KJ2791
负责人：
大村紀子
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Tokyo University of Pharmacy and Life Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2023
资助国家：
日本
起止时间：
2023-03-08 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ2791/
关键词：
リードスルーナンセンス変異遺伝性疾患ネガマイシン

项目摘要

ネガマイシン誘導体のリードスルー活性に関連する標的分子の同定を目的とし、アフィニティービーズの合成に着手した。前年度の構造活性相関研究より見いだされた、高活性誘導体TCP-306をリガンドとして磁気ビーズへの固定化を行い、COS-7細胞ライセートを用いたケミカルプルダウンを実施した。しかしながら、ネガマイシン誘導体に由来する特異的なバンドを検出することはできず、標的分子に関する情報は得られなかった。今後、ネガマイシン誘導体がタンパク質以外の分子を標的としている可能性も視野に入れ、引き続きリードスルー活性に関連する標的分子の同定を目指す。さらに本年度は、リードスルー作用の活性発現メカニズムの解明に迫るべく、ネガマイシン誘導体TCP-306がリードスルーを起こしやすい遺伝子配列的特徴（リードスルー特性）を調査した。リードスルーの起こりやすさ（リードスルー効率）は、i)PTCの種類、ii)そのmRNA上の存在位置、ⅲ)PTC周辺の塩基配列に大きく影響を受けることが知られている。筋ジストロフィーの原因遺伝子中のナンセンス変異配列13種を対象としたデュアルレポーターアッセイにより、遺伝子配列間および化合物間でのリードスルー効率を比較した。その結果、リードスルー化合物としてよく研究されているアミノグリコシドG418はDMD S319X(TGA-C)およびLAMA2 R1549X(TGA-C)配列に対し、比較的高いリードスルー効率を示した。一方、TCP-306はDMD R3381X(TGA-A)とLAMA2 C1546X(TGA-A)に対してG418を凌ぐリードスルー効率を示した。このことからネガマイシン誘導体はG418とは異なるリードスルー特性を示すことが示唆された。

进行亲和力珠的合成是为了确定与否元素衍生物的直通活性有关的靶分子。在上一年的结构 - 活性关系研究中发现的高度活性的TCP-306被固定在磁珠上作为配体，并使用COS-7细胞裂解物进行了化学下拉。但是，无法检测到源自否霉素衍生物的特定条带，也没有获得有关目标分子的信息。将来，我们调查了否定霉素衍生物靶向蛋白质以外的分子的可能性，并继续旨在鉴定与读取活性相关的靶分子。此外，今年为了阐明读取作用的活性表达的机理，我们研究了容易通过尼美霉素衍生物TCP-306读取的基因序列特征（读取特征）。众所周知，读取效率受PTC类型，ii）在mRNA上的存在以及ii）PTC周围的基本序列的很大影响。在基因序列和化合物之间比较了靶向肌营养不良症的基因中的13个废话突变序列的读取效率。结果，对DMD S319X（TGA-C）和LAMA2 R1549X（TGA-C）序列的氨基糖苷G418（被充分研究）的读取效率相对较高。同时，与G418相比，TCP-306在DMD R3381X（TGA-A）和LAMA2 C1546X（TGA-A）上显示出通读效率。这表明否降霉素衍生物具有与G418不同的读取特性。

项目成果

期刊论文数量（8）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

筋ジストロフィー由来ナンセンス変異に対するネガマイシン誘導体のリードスルー効率

奈加霉素衍生物对抗肌营养不良症无义突变的通读效率

DOI：
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
大村紀子;田口晃弘;濵田圭佑;今野翔;谷口敦彦;林良雄
通讯作者：
林良雄

Structure-Activity Relationship Study Focusing on 3-epi-Deoxynegamycin for Readthrough Activity

结构-活性关系研究重点关注 3-表-脱氧霉素的通读活性

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
Noriko Omura;Akihiro Taguchi;Keisuke Hamada;Tomoki Kuwahara;Mizuki Watanabe;Masanori Nakakuki;Sho Konno;Kentaro Takayama;Atsuhiko Taniguchi;Toshifumi Nomura;Satoshi Shuto;Yoshio Hayashi
通讯作者：
Yoshio Hayashi

分子空間固定型ネガマイシンの合成とそのリードスルー活性評価

分子空间固定负霉素的合成及其通读活性评价

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
大村紀子;田口晃弘;濵田圭佑;桑原智希;渡邉瑞貴;中久木正則;今野翔;高山健太郎;谷口敦彦;乃村俊史;周東智;林良雄
通讯作者：
林良雄

ネガマイシン3位アミノ基誘導体の創製と各種遺伝性疾患に対するリードスルー効果の検討

奈加霉素3-氨基衍生物的创建及对多种遗传病的通读作用研究

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
大村紀子;濵田圭佑;田口晃弘;今野翔;高山健太郎;谷口敦彦;林良雄
通讯作者：
林良雄

DEVELOPMENT OF CONFORMATIONALLY RESTRICTED NEGAMYCIN DERIVATIVES FOR POTENT READTHROUGH ACTIVITY

开发构象限制的负霉素衍生物以实现有效的通读活性

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
Noriko Omura;Akihiro Taguchi;Keisuke Hamada;Tomoki Kuwahara;Mizuki Watanabe;Masanori Nakakuki;Sho Konno;Kentaro Takayama;Atsuhiko Taniguchi;Toshifumi Nomura;Satoshi Shuto;Yoshio Hayashi
通讯作者：
Yoshio Hayashi