分子空間固定型ネガマイシンの標的分子同定と論理的リードスルー創薬への展開

点击翻译按钮获取中文摘要

ネガマイシン誘導体のリードスルー活性に関連する標的分子の同定を目的とし、アフィニティービーズの合成に着手した。前年度の構造活性相関研究より見いだされた、高活性誘導体TCP-306をリガンドとして磁気ビーズへの固定化を行い、COS-7細胞ライセートを用いたケミカルプルダウンを実施した。しかしながら、ネガマイシン誘導体に由来する特異的なバンドを検出することはできず、標的分子に関する情報は得られなかった。今後、ネガマイシン誘導体がタンパク質以外の分子を標的としている可能性も視野に入れ、引き続きリードスルー活性に関連する標的分子の同定を目指す。さらに本年度は、リードスルー作用の活性発現メカニズムの解明に迫るべく、ネガマイシン誘導体TCP-306がリードスルーを起こしやすい遺伝子配列的特徴（リードスルー特性）を調査した。リードスルーの起こりやすさ（リードスルー効率）は、i)PTCの種類、ii)そのmRNA上の存在位置、ⅲ)PTC周辺の塩基配列に大きく影響を受けることが知られている。筋ジストロフィーの原因遺伝子中のナンセンス変異配列13種を対象としたデュアルレポーターアッセイにより、遺伝子配列間および化合物間でのリードスルー効率を比較した。その結果、リードスルー化合物としてよく研究されているアミノグリコシドG418はDMD S319X(TGA-C)およびLAMA2 R1549X(TGA-C)配列に対し、比較的高いリードスルー効率を示した。一方、TCP-306はDMD R3381X(TGA-A)とLAMA2 C1546X(TGA-A)に対してG418を凌ぐリードスルー効率を示した。このことからネガマイシン誘導体はG418とは異なるリードスルー特性を示すことが示唆された。