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イネ育種のための貯蔵タンパク質遺伝子の構造解析および発現制御

水稻育种储存蛋白基因的结构分析及表达调控

基本信息

批准号：
60125006
负责人：
田中国介
金额：
$ 0.83万
依托单位：
Kyoto Prefectural University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Special Project Research
财政年份：
1985
资助国家：
日本
起止时间：
1985 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-60125006/
关键词：
イネプロラミングルテリン cDNAライブラリーイネ胚乳突然変異

项目摘要

遺伝子操作による植物育種を実現させるためのモデルタンパク質としてイネ貯蔵タンパク質のイネ・プロラミン,イネ・グルテリン遺伝子を選んだ。1:登熟期イネ胚乳細胞で発現するmRNAに対するcDNAライブラリーの作成とイネプロラミン、イネグルテリンcDNAの同定。プロラミン,グルテリン遺伝子を同時に発現する"金南風"胚乳よりOligodTカラムを用いpoly A RNA画分を得た。このRNA画分を用いcDNAライブラリーを作成した。このライブラリー中よりイネ・プロラミン,イネ・グルテリン抗ウサギ抗体と反応するタンパク質を生産する大腸菌を分離した。グルテリンを生産すると思われる大腸菌の一つには挿入配列3kbpのプラスミドが存在した。このプラスミドはウサギ網状赤血球ライゼートを用いるグルテリン合成を特異的に阻害し、グルテリンcDNAの配列をもつことを示した。このcDNA配列は制限酵素Pst1で5ヶの断片に分かれることが明らかになり、各断片について塩基配列決定を行った。2:突然変異イネ胚乳の貯蔵タンパク質分析。金南風の受精卵に対するN-メチルニトロソウレア処理によって得られる突然変異株の中にプロラミン型(CM:1834),グルテリン型(CM:21)の変異体を見い出した。これらは貯蔵タンパク質の発現制御部位に変化があるはずてあり、その塩基配列の解明による植物タンパク質の発現制御機構理解のための貴重な材料が得られた。

Plant Breeding Plant Breeding Plant Breeding Plant Breeding Plant Breeding Plant Breeding Plant Breeding Plant Breedingのイネ・プロラミン,イネ・グルテリン缝子を选んだ. 1: The endosperm cells in the mature stage are mature and the mRNA and cDNA are present.ブラリーの成とイネプロラミン, イネグルテリンcDNAのdetermination.プロラミン,グルテリン伝子をsimultaneouslyに発appearする"金南风" endosperm よりOligodTカラムをwith いpoly A RNA draw pointsをgetた.このRNA drawing points are made of いcDNA ライブラリーを.このライブラリー中よりイネ・プロラミン,イネ・グルテリンanti Antibody and anti-antibodies are produced and isolated from coliform bacteria.グルテリンをproduced by すると思われる coliform の一つには insert arrangement 3kbp のプラスミドがexisting した.このプラスミドはウサギReticular red blood cell ライゼートを Use いるグルテリン合The specific にblocking and グルテリンcDNA alignment をもつことをshows した. The restriction enzyme Pst1 in the cDNA alignment is divided into 5 fragments, and each fragment is arranged in a sequence to determine the sequence of the fragments. 2: Analysis of the quality of the endosperm stored in the sudden change. Kinnanfeng's fertilized eggs are fertilized N-メチルニトロソウレアprocessingによって得られるsuddenly transformed into a different strain. The にプロラミン type (CM: 1834), the グルテリン type (CM: 21) are the variants of the を见い出した.これらは电タンパク性の発existing control part に変化があるはずてあり、その塩base arrangementの解明によるPlant タンパク性の発existing control mechanism understanding のためのvaluable なmaterial がgetられた.