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マクロファージ特異的遺伝子の塩基配列の検索

搜索巨噬细胞特异性基因的碱基序列

基本信息

批准号：
61570244
负责人：
山本俊輔
金额：
$ 1.15万
依托单位：
大分医科大学
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1986
资助国家：
日本
起止时间：
1986 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

我々はヒトマクロファージ(Μφ)-マウス骨髄腫間融合細胞(a-HINS-B3細胞;Μφ形質を発現)のポリ【(A)^+】RNAから独自のcDNAサブトラクション法によりa-HINS-B3細胞特異的な種々のcDNAクローンを樹立した。これらのクローンのうち今年度はコピー数が多いあるいは細胞特異性が高いなどの興味あるクローンの塩基配列をジデオキシ法により解析した。HIC4はコピー数が多いこととa-HINS-B3細胞を含む他のΜφ化融合細胞やマウスΜφcell line,RAW264細胞などにのみ転写される遺伝子クローンであり、まずこのクローンについて解析した。その結果、この遺伝子はモロニーマウス白血病ウィルスあるいはそのMCFウィルスの3´long terminal repeat(LTR)と酷似した構造とenv遺伝子の3´側の断片からなる560bpの遺伝子であることが判明した。HIC4についてはさらにa-HINS-B3細胞DNAをEMBL3に挿入したファージクローンライブラリーから約10クローンを釣り上げ当該ウィルスの全構造とプロウィルスの組込み部の周辺遺伝子構造ならびに転写状態を検討した。その結果5´LTRの上流約4Kbの部にある2Kbの細胞遺伝子がΜφ化した融合細胞およびRAW264細胞で特異的に転写されていることが判明した。このようにHIC4関連遺伝子の周辺遺伝子の活性化がみられることから、これがΜφ化とどのような相関を持つかについて検討を進めている。次に【II】E4は約1Kbの転写物をコードする遺伝子であり、種々の細胞でもある程度の転写が見られるが、Μφで最も発現が強い。この遺伝子の約半分の長さに相当する塩基配列の検索では、これ迄に報告されていない遺伝子であった。次にMS2およびMS7は各々約5Kbと2.1Kbの転写物をコードするΜφ化融合細胞,RAW264およびΜφでのみ発現されている真にΜφ特異的な遺伝子であり、現在pUCプラスミドへの再クローン化も終え、塩基配列の検索を進めている。この他MS5は塩基配列によりクラス【I】抗原をコードする遺伝子であることが判明した。

My 々はヒトマクロファージ(Μφ)-マウス intercondylar fusion cell (a-HINS-B3 cell; Μφmorphosisを発appear)のポリ【(A)^ +】RNAから original cDNA サブトラクション method によりa-HINS-B3 cell-specific なkind 々のcDNA クローンをEstablishment した.これらのクローンのうちThis year's はコピーnumberが多いあるいはcell specificが高いなどの心丝あるクローンの塩组组をジデオキシ法によりanalyticsした. HIC4 HINS-B3 cell fusion cell line,RAW264cellなどにのみ転WRITEされる伝子クローンであり、まずこのクローンについてanalyticsした.そのRESULT、この缝子はモロニーマウスleukemiaウィルスあるいはそのMCFウィルスの3´long terminal repeat(LTR) is very similar to the structure of the env left 伝子の 3´ side の fragment からなる 560bp の伝子であることが clarified した. About 10クローンを鱼出り上げshould be the whole structure of the ウィルスのとプロウィルスの组込み部のweek躺伝子 Structure ならびに転WRITE STATUS を検多した. The results of the 5´LTR upper stream are approximately 4Kb, and the cells are still 2Kb long. The fused cells are specific to the RAW264 cells.このようにHIC4-related 缝子のweek舺缝子のactivationがみられることから、これがΜφ化とどのようなrelated をhold つかについて検検を入めている. 【II】E4はabout 1Kbの転物をコードする伝子であり、kind 々のcell でもある Degree の転WRITE が见られるが, Μφでmost も発 appear が强い. The この伝子のabout half a long さに is equivalent to the する塩塩综合的検SO では, and the これ到に report されていない缝子であった. Sub-MS2 MS7 each is about 5Kb and 2.1Kb each is a fusion cell, RAW264 is a fusion cell Now it's true, now it's true, now it's a special one, now pUCスミドへの Zaiクローン化もEndえ、塩组组组の検SO を入めている.このhis MS5 base arrangement によりクラス【I】antigen をコードする伝子であることが clarified した.