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X線溶液散乱法による蛋白質分子の動的構造研究

X射线溶液散射法研究蛋白质分子的动态结构

基本信息

批准号：
62220021
负责人：
田中信夫
金额：
$ 0.83万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Special Project Research
财政年份：
1987
资助国家：
日本
起止时间：
1987 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

昭和62年度は, 主としてウサギの筋肉から抽出精製したアルドラーゼ分子の動的構造について研究を行った.アルドラーゼは生理的条件下で四つのサブユニットから成る四量体として存在し, その触媒機能をはたす. このサブユニット構造は機能発現に大きな役割をはたしPH変化にともなう触媒活性の低下はその構造変化と深くかかわりあっている. 昨年度の研究ではこのサブユニット構造がPHの低下に伴って変化しPH=2.7では単量体として存在することが示唆された. 本年度はこのPH変化に伴う構造変化を時分割X線小角散乱法を用いて解析した.測定は高エネルギー物理学研究所放射光実験施設の酵素回折計を使って行った. frame2秒の時分割で30frameにわたる反応を追跡して散乱強度を測定した. また, データの精度を向上させるために上記反応過程を10回繰り返し測定し積算した(測定温度10°C).その結果, アルドラーゼ分子の慣性半径Rgおよび分子量に対応する原点強度の対数lnI(0)は反応開始後大きく減少した. これらの減少は次第に小さくなり50秒後には反応の終了を示唆する一定の値に達した. 昨年度の研究結果からこれらの値は単量体のパラメーターに相当している.次に得られたパラメーターを使って, 反応速度論な考察を行った. 小角散乱の解析から求まる分子の体積変化から解離度を見積り種々の反応過程をシュミレートした. その結果, A→nBの反応でn=4の場合実測データをよく満足した. 従って, PH2.7へのPH変化では四量体が単量体に解離することが確認された. また, この反応の速度定数は光散乱法, けい光法より得られた値とよく一致した. このように, 強力なX線源を用いることによって分子の構造に関する情報のみならず速度論的パラメーターも得られX線溶液散乱法の新しい側面を見い出すことができた.

In Showa 62, the main purpose of the study was to refine the structure of molecular dynamics. Under physiological conditions, the four components exist and their catalytic functions are reversed. The structure and function of the catalyst are changed greatly. The activity of the catalyst is decreased. Last year's study showed that the PH of the structure was lower than that of PH=2.7, and that there was a single mass. This year's PH transformation is accompanied by structural transformation. X-ray small angle scattering method is used for analysis. The measurement of high temperature radiation in the Institute of Physics is carried out by an enzyme back-analysis system. Frame2 seconds divided into 30 frames The accuracy of the measurement is up to 10 ° C. The measurement temperature is 10°C. As a result, the radius of inertia of the molecule Rg and the number of pairs of origin intensities lnI(0) decrease greatly after the onset of the reaction. This is the first time that the number of seconds is reduced. After 50 seconds, the number of seconds is reduced. Last year's research results showed that the value of the sample was significantly higher than that of the sample. The second time, the speed theory was investigated. The resolution of small angle scattering is to find the volume change of molecules, the dissociation degree is to see the integration of species and the reaction process. As a result, A→nB and n=4 were measured. In addition, PH 2.7 and PH 2.7 were converted into four components, and the dissociation of four components into one component was confirmed. The speed of the reaction is determined by the light scattering method, and the light scattering method is determined by the light scattering method. The X-ray source is used to generate strong X-ray energy, and the molecular structure is used to generate information related to the X-ray scattering method.