Bacterial 2,4-dioxygenases: Catalytic mechanism of 2,4-dioxygenolytic ring cleavage

细菌 2,4-双加氧酶：2,4-双加氧环裂解的催化机制

• 批准号: 5221858
• 负责人: Professorin Dr. Susanne Fetzner
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Molekulare Mikrobiologie und Biotechnologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1998-12-31 至 2008-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5221858?language=en
• 关键词: Bacterial; dioxygenases; Catalytic; mechanism; dioxygenolytic

Die bakteriellen Enzyme 1H-3-Hydroxy-4-oxochinolin-2,4-Dioxygenase (Qdo) und 1H-3-Hydroxy-4-oxochinaldin-2,4-Dioxygenase (Hod) und die eukaryontische Flavonol-2,4-Dioxygenase (F24D) katalysieren die Spaltung von N- bzw. O-Heterozyklen unter Freisetzung von Kohlenmonoxid. Eine prokaryontische F24D ist bisher nicht beschrieben. Qdo und Hod enthalten weder ein Metallzentrum noch einen organischen Cofaktor. Die von den Strukturgenen qdo und hod abgeleiteten Aminosäuresequenzen zeigen keinerlei Homologie zu bekannten Oxygenasen, sondern besitzen zwar geringe, aber signifikante Ähnlichkeit zu Enzymen des alpha/beta-Hydrolase-Faltungstyps. Eigene Arbeiten deuten darauf hin, daß Qdo katalytisch relevante Ser- und His-Reste besitzt, die den Ser- und His-Resten der katalytischen Triade der Serin-Hydrolasen entsprechen, so daß Qdo nicht nur strukturell, sondern auch funktionell mit Proteinen des alpha/beta-Hydrolase-Faltungstyps verwandt zu sein scheint.(i) Die für Substratbindung und Katalyse relevanten Aminosäurereste der Qdo und Hod sollen identifiziert werden (gerichtete Mutagenese; chemische Derivatisierungen; Substrat-trapping); (ii) es soll versucht werden, Hod und evtl. Qdo zu kristallisieren (für Röntgenstrukturanalysen); (iii) eine prokaryontische F24D soll gereinigt und mit Qdo und Hod bzw. eukaryontischen F24Ds verglichen werden. Das Ziel ist die Aufklärung des Katalysemechanismus der enzymatischen 2,4-Dioxygenolyse.Versuche zur Kristallisation von Qdo und Hod erfolgen in Kooperation mit Prof. B. Dijkstra, Groningen.

Die Bakeriellen酶1H-3-羟基-4-氧化酶-2,4-二氧酶（QDO）UND 1H-3-HYDROXY-4-羟基-4-氧化节-2,4-氧化酶-2,4-二氧酶（HOD）和DIE EUKARYONTISCHE FLAVONOL-2,4-DIOXENOL-2,4-DIOXGEN酶（F24） o-杂化剂unter freisetzung von kohlennmoxide。 Eine Prokaryontische F24D是成为粉丝的最佳场所。 QDO und Hod焓weder ein组织拥有强大的影响力。该公司在氧合酶，Sondern Besitzen Zwar Geringe和两国之间的酶促关系中都有很强的业务。该组织在美国和中国拥有强大的业务。该组织在美国和中国拥有强大的业务，并且在美国和中国拥有强大的业务。 （ii）sudstratbindung und katalyse-relevantenaminosäureresteder qdo und hod sollen鉴定fisiert（gerichtete诱变剂； chemische derivatisierungen; sudprapping）; （ii）Es Soll Versucht Werden，Hod und Evtl。 Qdo Zu Kristallisieren（fürRöntgenstrukturanalysen）； （iii）Eine Prokaryontische F24D Soll Gereinigt和Mit Qdo und Hod Bzw. Eukaryontischen F24DS Verglichen Werden。 Das Ziel Ist Dieaufklärungdes Katalysemegricanismus der ermzymatischen 2,4-二氧化物。