Expression and mutagenesis of genes coding for molybdenum hydroxylases from bacteria. Characterization of catabolic plasmids (quinaldine degradation)

细菌钼羟化酶编码基因的表达和诱变。

• 批准号: 5399129
• 负责人: Professorin Dr. Susanne Fetzner
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Molekulare Mikrobiologie und Biotechnologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2002-12-31 至 2005-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5399129?language=en
• 关键词: Expression; mutagenesis; genes; coding; molybdenum

(I) Die Isochinolin-1-oxidoreduktase (Ior), ein heterodimeres Molybdo-Eisen/Schwefel-Protein mit Molybdopterin-Cytosin-Dinucleotid-Cofaktor, unterscheidet sich von anderen molybdänhaltigen Hydroxylasen des N-Heteroaromatenabbaus durch eine abweichende Anordnung von "Domänen", [2Fe2S]-Zentren mit sehr hohen Reduktionspotentialen sowie einem außergewöhnlichen kinetischen Verhalten bei der Reduktion des Molybdänzentrums. Zum Verständnis der Katalyse der Ior sind Konstruktion, Produktion und Charakterisierung von Proteinvarianten von besonderem Interesse. Dazu muss zunächst ein System zur funktionellen Expression der Gene der Ior etabliert werden. Durch gerichtete ortsspezifische Mutagenese und Analyse der Proteinvarianten sollen dann katalytisch relevante Aminosäurereste der Ior und des MolybdoEisen/Schwefel-Flavoproteins Chinolin-2-oxidoreduktase (Qor) identifiziert werden. (II) Die Fähigkeit, Chinaldin zu oxidieren bzw. abzubauen, scheint bei sechs Chinaldin verwertenden Bakterienstämmen auf einem ca. 100 kb großen Plasmid codiert zu sein; die meisten dieser Stämme enthalten mindestens ein zusätzliches Plasmid. Die Charakterisierung dieses neuen Chinaldinabbau-Plasmids ist ein weiteres Ziel des Vorhabens, außerdem soll das degradative Potential der Bakterienstämme (Abbau verschiedener "Xenobiotika") und die Rolle der weiteren Plasmide in katabolen Stoffwechselprozessen untersucht werden.

(I) 异喹啉-1-氧化还原酶 (Ior)，异二聚体 Molybdo-Eisen/Schwefel-Protein 与 Molybdopterin-Cytosin-Dinucleotid-Cofaktor，Unterscheidet sich von anderen molybdänhaltigen Hydroxylasen des N-Heteroaromatenabbaus durch eine abweichende Anordnung von “Domänen”，[2Fe2S]-Zentren mit sehr hohen Reduktionspotialen sowie einem außergewöhnlichen kinetischen Verhalten bei der Reduktion des Molybdänzentrums。 Zum Verständnis der Ior sind Konstruktion, Produktion und Charakterisierung von Proteinvarianten von besonderem Interests. Dazu muss zunächst ein System zur functionellen Expression der Gene der Ior etabliert werden。蛋白质变体的诱变和分析与 Ior 和 MolybdoEisen/Schwefel-Flavo Proteins Chinolin-2-Oxidoreduktase (Qor) 鉴定相关的催化相关的蛋白质变体的突变和分析。 (II) Die Fähigkeit, Chinaldin zu oxytieren bzw。 abzubauen，scheint bei sechs Chinaldin verwertenden Bakterienstämmen auf einem ca。 100 kb 大质粒 codiert zu sein; die meisten dieser Stämme enthalten mindestens ein zusätzliches Plasmid。新 Chinaldinabbau-Plasmids 的特征是 Vorhabens 的 Ziel des Vorhabens，它是 Bakterienstämme (Abbau verschiedener“Xenobiotika”) 的降解潜力和 katabolen Stoffwechselprozessen untersucht 中的 Rolle der weiteren 质粒韦尔登。