Expression and mutagenesis of genes coding for molybdenum hydroxylases from bacteria. Characterization of catabolic plasmids (quinaldine degradation)

细菌钼羟化酶编码基因的表达和诱变。

• 批准号: 5399129
• 负责人: Professorin Dr. Susanne Fetzner
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Molekulare Mikrobiologie und Biotechnologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2002-12-31 至 2005-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5399129?language=en
• 关键词: Expression; mutagenesis; genes; coding; molybdenum

(I) Die Isochinolin-1-oxidoreduktase (Ior), ein heterodimeres Molybdo-Eisen/Schwefel-Protein mit Molybdopterin-Cytosin-Dinucleotid-Cofaktor, unterscheidet sich von anderen molybdänhaltigen Hydroxylasen des N-Heteroaromatenabbaus durch eine abweichende Anordnung von "Domänen", [2Fe2S]-Zentren mit sehr hohen Reduktionspotentialen sowie einem außergewöhnlichen kinetischen Verhalten bei der Reduktion des Molybdänzentrums. Zum Verständnis der Katalyse der Ior sind Konstruktion, Produktion und Charakterisierung von Proteinvarianten von besonderem Interesse. Dazu muss zunächst ein System zur funktionellen Expression der Gene der Ior etabliert werden. Durch gerichtete ortsspezifische Mutagenese und Analyse der Proteinvarianten sollen dann katalytisch relevante Aminosäurereste der Ior und des MolybdoEisen/Schwefel-Flavoproteins Chinolin-2-oxidoreduktase (Qor) identifiziert werden. (II) Die Fähigkeit, Chinaldin zu oxidieren bzw. abzubauen, scheint bei sechs Chinaldin verwertenden Bakterienstämmen auf einem ca. 100 kb großen Plasmid codiert zu sein; die meisten dieser Stämme enthalten mindestens ein zusätzliches Plasmid. Die Charakterisierung dieses neuen Chinaldinabbau-Plasmids ist ein weiteres Ziel des Vorhabens, außerdem soll das degradative Potential der Bakterienstämme (Abbau verschiedener "Xenobiotika") und die Rolle der weiteren Plasmide in katabolen Stoffwechselprozessen untersucht werden.

（i）异胆素蛋白1-氧化酶（IOR），molybdo-eisen/schwefel-protein mit molybdo-eisen/schwefel-protein mit molybdo-partner-cytosin-cytosin-cytosin-dinucleitid-cofaktor--------------- [2FE2S] - Zentren Mit Sehrer托管的重新分子sowie einemaußergewöhnlichenkinetischen verhalten beider beider the des molybdenums。 katalyse der ior sind konstruktion，produkuktion und charakterisierung和proteinvariant von besonderem Interesse。该系统的形式是使世界吓倒的系统。该公司还以其自己的行动而闻名并表达了系统。该公司还以其自己的行动而闻名并表达了系统。 moleybdoeisen/schwefel-flavoprotins Chinolin-2-氧化酶（QOR）识别Werden。 （ii）Diefähigkeit，Chinaldin Zu coxidieren bzw. Abzubauen，scheint bei sechs chinaldin verwertendenbakterienstämmenauf einem ca。 100 kbgroßen质粒编码Zu sein; DIE MEISTENDIESERSTämme焓的Mindestens EinZusätzliches质粒。 Die Charakterisierung Dieses Neuen Chinaldinabbau质量降解潜在的Bakterienstämme（Abbau Verschiedener“ Xenobiotika”）是对未来未来的完美匹配。