Das Proteom der Chinolindegradation bei Pseudomonas putida 86.
恶臭假单胞菌 86 中喹啉降解的蛋白质组。
基本信息
- 批准号:5323390
- 负责人:
- 金额:--
- 依托单位:
- 依托单位国家:德国
- 项目类别:Research Grants
- 财政年份:2001
- 资助国家:德国
- 起止时间:2000-12-31 至 2003-12-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
Pseudomonas putida 86 verwertet Chinolin als einzige C- und Energiequelle. Die Chinolin-2-Oxidoreduktase (Qor), ein Enzym der Xanthinoxidase-Familie mit Molybdän-Pyranopterin-Cytosin-Dinucleotid-Cofaktor (Mo-MCD) und weiteren Redoxzentren, leitet den Abbau ein. Der Stamm enthält auch eine Xanthin-Dehydrogenase (XDH) mit Molybdän-Pyranopterin-Cofaktor (Mo-MPT). Die Sequenz der qor-Gene und flankierender Bereiche ist bekannt (17 kb). Es soll untersucht werden, welche der postulierten Gene dieser Bereiche der Induktion der Transkription durch Chinolin unterliegen. Durch Insertionsmutagenese von Genen des Genclusters soll geprüft werden, welche Genprodukte am Abbauweg und am "assembly" funktioneller Qor und/oder XDH beteiligt sind. Ein hypothetisches Gen "mocA" codiert möglicherweise die (bisher nicht nachgewiesene) Mo-MCD-Synthase, die die Umsetzung von Mo-MPT zu Mo-MCD katalysiert. Es soll geprüft werden, ob die heterologe Co-Expression von "mocA" und Strukturgenen einer Mo-haltigen Hydroxylase die Synthese funktionellen Mo-MCD-haltigen Enzyms erlaubt. Das Proteom Chinolin-induzierter Zellen von P. putida 86 soll mittels 2D-Elektrophorese analysiert werden; die NH2-Termini ausgewählter Proteine werden bestimmt, um daraus Oligonucleotid-Sonden abzuleiten. Die Gene dieser Proteine sollen kloniert und sequenziert werden. Ziel ist die Erfassung von Genen/Enzymen der Chinolindegradation, um ein Verständnis des Abbauweges zu erarbeiten.
恶臭假单胞菌86也会引起C和Energiequelle。黄嘌呤氧化酶家族Molybdän-Pyranopterin-Cytosin-Dinucleotid-Cofaktor (Mo-MCD)与黄嘌呤氧化还原酶(weiteren Redoxzentren),与Abbau等。Der Stamm enthält auch eine黄素脱氢酶(XDH) mit Molybdän-Pyranopterin-Cofaktor (Mo-MPT)。Die Sequenz der qor-Gene und flankierender Bereiche ist bekant (17kb)。这是一种不受影响的基因表达方式,如基因表达、转录诱导等。荷兰Insertionsmutagenese von Genen des Genclusters soll gepr<s:1> ft werden, welche genproduckte am Abbauweg和am“assembly”funktioneller Qor /oder XDH beillight sind。in hypothetisches Gen "mocA" codiert möglicherweise die (bisher night nachgewiesene) Mo-MCD- synthase, die die Umsetzung von Mo-MPT zu Mo-MCD catalsiert。研究了mocA - mcd -haltigen羟化酶与mocA - mcd -haltigen酶的异种共表达。蛋白质蛋白chinolin - industrierter Zellen von P. putida 86的二维电泳分析die NH2-Termini ausgewählter蛋白质werden估计,um daraus寡核苷酸- sonden abzuleiten。死亡基因:蛋白质的克隆与序列分析。Ziel ist die Erfassung von Genen/ chinol降解酶,um in Verständnis des Abbauweges zu erarbeen。
项目成果
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