Molekulare und biochemische Charakterisierung der Alginat-Polymerase aus Pseudomonas aeruginosa

铜绿假单胞菌藻酸盐聚合酶的分子和生化特征

• 批准号: 5386205
• 负责人: Professorin Dr. Susanne Fetzner
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Molekulare Mikrobiologie und Biotechnologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2001-12-31 至 2007-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5386205?language=en
• 关键词: Molekulare; und; biochemische; Charakterisierung; der

Im Rahmen des Vorhabens soll die Alginat-Polymerase, das Schlüsselenzym der Alginat-Biosynthese, aus Pseudomonas aeruginosa identifiziert, gereinigt und molekular charakterisiert werden. Zunächst soll ein empfindliches Enzymassay für die Alginat-Polymerase entwickelt werden, welches die Reinigung des nativen Enzyms ermöglichen soll. Das gereinigte Enzym soll biochemisch und enzymologisch charakterisiert werden. Es wurden bereits Gene (alg8, alg44, algK, algX) im Alginat-BiosyntheseGen-Cluster identifiziert, deren Genprodukte vermutlich die Alginat-Polymerase in der Cytoplasmamembran rekonstituieren. Diese Gene sollen in Escherichia coli, Pseudomonaden und isogenen Alginat-negativen Mutanten von P. aeruginosa, die kein Alginat bilden, funktionell exprimiert werden. Dies soll sowohl Hinweise auf die Funktion der Genprodukte als essentielle Untereinheiten der Alginat-Polymerase liefern als auch die Reinigung dieses Enzyms erleichtern. Zusätzlich soll die Reinigung der nativen Alginat-Polymerase aus Alginat-überproduzierenden Mutanten von P. aeruginosa vorgenommen werden und die Untereinheiten identifiziert werden. Die Etablierung eines empfindlichen Enzymassays und die Verfügbarkeit gereinigter Alginat-Polymerase würde zum einen die in vitro Synthese von definierten Alginatmolekülen erlauben und zum anderen das Screening nach Inhibitoren ermöglichen, die die Entwicklung von Biofilmen verhindern würden. Die Funktion der Alginat-Biosynthese bei der Überdauerung differenzierter Biofilme soll evaluiert werden. Durch heterologe Expression von Alginat-Biosynthesegenen soll ebenso die Biosynthese definierter Alginate, die als biokompatible Materialien für vielfältige medizinische Anwendungen eingesetzt werden können, ermöglicht werden.

研究了藻酸盐聚合酶、藻酸盐生物合成酶、铜绿假单胞菌的鉴定、基因及分子特性。Zunächst soll ein empfindliches enzymatic f<e:1> r die Alginat-Polymerase entwickelt werden, welches die Reinigung des innate enzymes ermöglichen soll。酶、溶胶生化及酶学特性研究。海藻酸盐-生物合成-聚类鉴定的基因（alg8, alg44, algK, algX），细胞质膜重组的genproduckte vermutlich死亡海藻酸盐-聚合酶。大肠杆菌，假单胞菌和异基因褐藻酸盐阴性突变体，褐藻酸盐突变体，功能细胞实验研究。海藻酸盐聚合酶的功能，海藻酸盐聚合酶的功能，海藻酸盐聚合酶的功能，海藻酸盐聚合酶的功能，海藻酸盐聚合酶的功能，海藻酸盐聚合酶的功能。Zusätzlich soll die Reinigung der天然海藻酸盐聚合酶与海藻酸盐- <s:1>产藻酸盐-产藻酸盐的突变体von aeruginosa vorgengenmen和die untereinheet identifiziert werden。Die Etablierung eines empfindlichen enzymatic ays and Die verf<e:1> - barkeit gereinigter Alginat-Polymerase w<e:1> rde zum einen Die体外合成definierten alginatmoleklen erlauben and zum anderen筛选nach inhibitor ermöglichen， Die Die Entwicklung von Biofilmen verhindern w<e:1> rden。海藻酸盐生物合成技术的研究进展Überdauerung不同生物膜的生物膜性能评价。海藻酸盐的克隆表达-生物合成定义物-海藻酸盐，海藻酸盐，海藻酸盐和生物相容性材料<e:2> vielfältige medizinische Anwendungen eingesetzt werden können, ermöglicht werden。