Carbon monoxide forming dioxygenases: Non-copper quercetinases from Streptomyces sp. and Actinoplanes missouriensis

一氧化碳形成双加氧酶：来自链霉菌属的非铜槲皮素酶。

• 批准号: 5437783
• 负责人: Professorin Dr. Susanne Fetzner
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Molekulare Mikrobiologie und Biotechnologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2003-12-31 至 2007-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5437783?language=en
• 关键词: Carbon; monoxide; forming; dioxygenases; Non

Der mikrobielle Abbau des Flavonols Quercetin beginnt mit einer 2,4-dioxygenolytischen Spaltung des O-heterozyklischen Ring durch eine Kohlenmonoxid bildende Quercetinase. Im Gegensatz zu den bekannten Cu2+-Quercetinasen aus Aspergillus spp. sind die Enzyme aus Streptomyces sp. und Actinoplanes missouriensis nicht Cu-haltig. Diese neuen bakteriellen Quercetinasen sollen charakterisiert und mit anderen CO bildenden Dioxygenasen verglichen werden (Cu2+-Quercetinasen, Eisen-haltige Quercetinase von Bacillus subtilis, cofaktorfreie 1H-3-Hydroxy-(2-methyl-)4-oxochinolin-2,4-dioxygenasen; Ni2+-Acireducton-Dioxygenase). Die cofaktorfreien 2,4-Dioxygenasen ähneln Enzymen mit a/bHydrolase-Faltung, während die bisher bekannten Quercetinasen zur Cupin-Superfamilie gehören. Es stellen sich folgende Fragen: (1) Lassen sich die neuen bakteriellen Quercetinasen in eine dieser Superfamilien einordnen oder gehören sie zu einer anderen/eigenen Proteinfamilie? (2) Sind die Katalysemechanismen der CO bildenden Dioxygenasen vergleichbar oder gibt es unterschiedliche Wege zur Katalyse ähnlicher Reaktionen? Das Vorhaben umfasst: 1. Identifizierung, Klonierung und Sequenzierung der Gene der Quercetinasen von Streptomyces sp. und A. missouriensis. 2. Heterologe Expression der Gene und Reinigung der Proteine. 3. Charakterisierung der Cofaktoren (falls vorhanden) und biochemischer Eigenschaften. 4. Versuch der Kristallisation der Proteine. Die Untersuchungen sind von Bedeutung für das Verständnis der Evolution funktionell ähnlicher Enzyme und der Katalysemechanismen ringspaltender Dioxygenasen.

Der microbielle Abbau des黄酮醇槲皮素开始于einer 2,4-dioxygenolytischen Spaltung des o -杂合klischen Ring durch eine kohlenmonoid bildende槲皮素酶。研究了曲霉、链霉菌、密苏里放线菌对Cu2+-槲皮素酶的抑制作用。枯草芽孢杆菌的槲皮素酶（Cu2+-槲皮素）；枯草芽孢杆菌的槲皮素酶（Eisen-haltige）；Ni2 + -Acireducton-Dioxygenase)。Die cofaktorfreien 2,4- dioxygenasen ähneln enzymatic mit a/b hydroase - faltung, während Die bisher bekannten quertinasen zur copper - superfamily gehören。(1) Lassen sich die neuen bakteriellen querticinasen in eine dieser Superfamilien einordnen oder gehören sie zu einer anderen/ eigenproteinfamily ？(2) CO - bio2 - dioxygenen - vergleichbar - odgies - interschiedlich - Wege - zur催化ähnlicher反应机理？Das Vorhaben unfast：槲皮素酶基因的鉴定、克隆和序列分析。2. 2 .基因表达与蛋白重组。3 .生物化学特征与生物化学特征。蛋白质的结晶化。Die Untersuchungen sind von Bedeutung f<s:1> r das Verständnis der Evolution functionell ähnlicher酵素与催化机制（Enzyme and der catalalechanechanmen ringspaltender dioxygenen）。