Carbon monoxide forming dioxygenases: Non-copper quercetinases from Streptomyces sp. and Actinoplanes missouriensis
一氧化碳形成双加氧酶:来自链霉菌属的非铜槲皮素酶。
基本信息
- 批准号:5437783
- 负责人:
- 金额:--
- 依托单位:
- 依托单位国家:德国
- 项目类别:Research Grants
- 财政年份:2004
- 资助国家:德国
- 起止时间:2003-12-31 至 2007-12-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
Der mikrobielle Abbau des Flavonols Quercetin beginnt mit einer 2,4-dioxygenolytischen Spaltung des O-heterozyklischen Ring durch eine Kohlenmonoxid bildende Quercetinase. Im Gegensatz zu den bekannten Cu2+-Quercetinasen aus Aspergillus spp. sind die Enzyme aus Streptomyces sp. und Actinoplanes missouriensis nicht Cu-haltig. Diese neuen bakteriellen Quercetinasen sollen charakterisiert und mit anderen CO bildenden Dioxygenasen verglichen werden (Cu2+-Quercetinasen, Eisen-haltige Quercetinase von Bacillus subtilis, cofaktorfreie 1H-3-Hydroxy-(2-methyl-)4-oxochinolin-2,4-dioxygenasen; Ni2+-Acireducton-Dioxygenase). Die cofaktorfreien 2,4-Dioxygenasen ähneln Enzymen mit a/bHydrolase-Faltung, während die bisher bekannten Quercetinasen zur Cupin-Superfamilie gehören. Es stellen sich folgende Fragen: (1) Lassen sich die neuen bakteriellen Quercetinasen in eine dieser Superfamilien einordnen oder gehören sie zu einer anderen/eigenen Proteinfamilie? (2) Sind die Katalysemechanismen der CO bildenden Dioxygenasen vergleichbar oder gibt es unterschiedliche Wege zur Katalyse ähnlicher Reaktionen? Das Vorhaben umfasst: 1. Identifizierung, Klonierung und Sequenzierung der Gene der Quercetinasen von Streptomyces sp. und A. missouriensis. 2. Heterologe Expression der Gene und Reinigung der Proteine. 3. Charakterisierung der Cofaktoren (falls vorhanden) und biochemischer Eigenschaften. 4. Versuch der Kristallisation der Proteine. Die Untersuchungen sind von Bedeutung für das Verständnis der Evolution funktionell ähnlicher Enzyme und der Katalysemechanismen ringspaltender Dioxygenasen.
Im Gegensatz Zu Den Bekannten Cu2+-Quercetinase aus aspergillus spp。 Sind Die酶Aus链霉菌属。 und actinoplanes Missouriensis Nicht Cu-Haltig。 diese neuen bakteriellen quercetinase sollen charakterisiert und mit die die cofaktorfreien 2,4-二氧酶mit a/bhydrololase-faltung,wahrrend die bisher bekannten bekannten bekannten- Es Stellen Sich Folgende Fragen:(1)Lassen Sich Die Neuen Bakteriellen Quercetinasen在Eine Dieser Superfamilien Einordnen oder einordnen odergehörensie zu zu zu zu zu zu zu zu zu zu zu zu zu zu zu zu zu zu zu zu einer anderen/eigenen proteinfamilie? (2)sind die katalysemegrinismen der co bildenden dioxygenasen vergleichbar oder gibt es unterschiedliche wege zur katalyseähnhlicherreaktionen? Das Vorhaben umfasst:1。Dissineifizierung,Klonierung und 2。杂洛格表达基因der基因und renigung der蛋白。 3。 4。对近代的蛋白质。 Die Untersuchung der bedeutungfürdasverständnisder Evolutionfunktionellähnlicher酶和katalysemechanismen ringspaltender dioxygenasen。
项目成果
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