Involvement of a halogenase in a non-heme-haloxidase in the biosynthesis of balhimycin

点击翻译按钮获取中文摘要

Im Gencluster für die Balhimycin-Biosynthese wurden Gene für eine NADH-abhängige Halogenase und eine "Nicht-Häm-Haloperoxidase" gefunden. Durch Untersuchungen der Substratspezifität soll ein leicht zugängliches Substrat für die NADH-abhängige Halogenase gefunden und darauf aufbauend ein Reinigungsverfahren entwickelt und das Enzym bezüglich seiner molekularen und kinetischen Eigenschaften charakterisiert werden. Nach Subklonierung des "Haloperoxidase"-Gens und Überexpression soll die "Haloperoxidase" gereinigt und anschließend charakterisiert werden. Das gereinigte Enzym soll mit bereits bekannten "Nicht-Häm-Haloperoxidasen" verglichen werden. Durch Einbringen des "Haloperoxidase"-Gens aus Streptomyces aureofaciens oder S. lividans in eine Mutante des Balhimycin-Produzenten, die keine aktive "Haloperoxidase" mehr produziert, soll geprüft werden, ob diese die entsprechende Funktion übernehmen können. Mit Hilfe einer entsprechenden Deletionsmutante soll die Rolle der "Nicht-Häm-Haloperoxidase" in der Balhimycin-Biosynthese untersucht und aufgeklärt werden, welche Substrate von den Nicht-Häm-Haloperoxidasen akzeptiert werden; hierbei könnten entscheidende Hinweise auf die allgemeine biologische Funktion dieser Enzyme erhalten werden.