SV40T抗原による細胞遺伝子発現の変化

SV40T 抗原引起的细胞基因表达的变化

基本信息

  • 批准号:
    01015017
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.56万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Cancer Research
  • 财政年份:
    1989
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1989 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

1.発現量の少ない細胞遺伝子の中で網膜芽細胞腫感受性遺伝子(Rb遺伝子)の発現がSV40によるトランスホーメーションまたは感染のみならず、アデノウイルスによるトランスホーメーションや感染により上昇することが明らかになった。ただし、既に癌化した細胞のHeLaやKBではアデノウイルス感染によるRb遺伝子発現の上昇が見られない。これはすでに発現量の高いためと考えられる。2.様々な核局在性蛋白質のcDNAを得る目的で、タグ付きcDNAライブラリー用ベクターを開発した。このベクターを用いてcDNAライブラリーを作ると一定の割合で、細胞にトランスフェクトしたとき、タグとしたSV40T抗原N末部分とcDNA由来の部分が結合したキメラ蛋白質を発現することのできるクローンが得られる。タグはモノクローン抗体PAb419で認識できる。cDNA由来の部分に核局在性のシグナルがあるとキメラ蛋白質も核局在性を示すことが期待される。実際、サル腎細胞CV1よりのmRNAを用いてcDNAライブラリーを作製し、細胞にトランスフェクトし、キメラ蛋白質の細胞内局在をPAb419を用いた蛍光抗体法で検討したところ、約30クローンに1つがキメラ蛋白質を作っており、キメラ蛋白質の内約4分の1のものが核局在性を示した。核局在性を示したクローンのcDNA部分につき、一次構造の決定等を行っている。タグをT抗原N末部分からCD4抗原N末部分へと変えることにより、膜局在性を示すクローンを分離可能なベクターを作ることができると期待されるので、検討中である。
1. 発 now fewer の な い cells survived 伝 child の で retinal bud cells swollen susceptibility heritage 伝 child (Rb heritage 伝) の 発 now が SV40 に よ る ト ラ ン ス ホ ー メ ー シ ョ ン ま た は infection の み な ら ず, ア デ ノ ウ イ ル ス に よ る ト ラ ン ス ホ ー メ ー シ ョ ン や infection に よ り rise す る こ と が Ming ら か に な っ た. た だ し, both に canceration し た cells の HeLa や KB で は ア デ ノ ウ イ ル ス infection に よ る Rb heritage 伝 son 発 rise is の が see ら れ な い. <s:1> れ すでに すでに occurrence volume <s:1> high ためと えられる examination えられる. 2. Others 々 な nuclear agency in sex protein の cDNA を で る purpose, タ グ pay き cDNA ラ イ ブ ラ リ ー with ベ ク タ ー を open 発 し た. こ の ベ ク タ ー を with い て cDNA ラ イ ブ ラ リ ー を as る と certain の cut で, cell に ト ラ ン ス フ ェ ク ト し た と き, タ グ と し た part at the end of the N と SV40T antigen cDNA part origin の が combining し た キ メ ラ protein を 発 now す る こ と の で き る ク ロ ー ン が must ら れ る. Youdaoplaceholder0, モノ, ロ, ロ antibody PAb419で, recognize で, る. The cDNA originated from the に nuclear localization of the に シグナ があるとキメラ があるとキメラ protein <s:1> nuclear localization of the があるとキメラ protein を indicated す とが とが expected される. Be international, サ ル renal cell CV1 よ り の mRNA を with い て cDNA ラ イ ブ ラ リ ー を cropping し, cell に ト ラ ン ス フ ェ ク ト し, キ メ ラ の intracellular protein bureau in を PAb419 を with い た 蛍 light antibody technique で beg し 検 た と こ ろ, about 30 ク ロ ー ン に 1 つ が キ メ ラ protein を as っ て お り, キ メ ラ の inside about protein 4 points <s:1> 1 <s:1> <s:1> が が the presence of the nuclear authority を indicates た た. The nuclear authority 's を indicates that the た, ロ, ロ, <s:1> cDNA part に,, る, and the determination of the primary structure <s:1> are in the を line って る る る. タ グ を part at the end of the N T antigen か ら CD4 antigen part at the end of the N へ と - え る こ と に よ り, film bureau in sexual を す ク ロ ー ン を separation may な ベ ク タ ー を as る こ と が で き る と expect さ れ る の で, beg the 検 で あ る.

项目成果

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科研奖励数量(0)
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专利数量(0)
C.Sugimoto: "Growth efficiency of naturallyーoccurring BK virus variants in vivo and in vitro." J.Virology. 63. 3195-3199 (1989)
C.Sugimoto:“天然存在的 BK 病毒变体在体内和体外的生长效率。J.Virology”63. 3195-3199 (1989)。
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