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SV40 T抗原による細胞遺伝子発現の変化

SV40 T 抗原引起的细胞基因表达变化

基本信息

批准号：
63015014
负责人：
菅野純夫
金额：
$ 3.01万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

SV40T抗原により発現の変化する細胞遺伝子が発現量の多いものの中に存在するかを温度感受性変異をもつT抗原遺伝子でトランスホームしたラット脳細胞でディファレンシャルハイブリダイゼーションを行って検討したが、大きく変化するものはなかった。このことからT抗原は発現量の多い細胞の遺伝子を変化させないことが判明した。一方、既にクローニングされている癌遺伝子等の遺伝子のSV40トランスホーム細胞内での発現も検討したが、その中でヒト網膜芽細胞腫感受性遺伝子の発現がトランスホーム細胞で上昇していることを見出した。(菅野、余郷)正常線維芽細胞株3Y1より岡山らによって開発された発現ベクターにcDNAライブラリーを作製した。このライブラリーをSV40によってトランスホームした細胞へトランスフェクションし、アドリアマイシン処理により正常細胞へ復帰したものを選別した。正常復帰細胞のあるものには、トランスフェクションしたcDNAライブラリー中のあるものが組みこまれていた。このcDNAクローンはSV40トランスホーム細胞を正常復帰させる活性をもつことが期待される。(山口)SV40T抗原と極めて似たはたらきをもつと考えられているc-myc蛋白質の結合するDNA断片を分離し、結合部位の塩基配列を決定した。この配列はDNA合成開始点として機能すること、近傍の遺伝子の発現を活性化することが明らかになった。この配列に極めて似た配列がhsp70遺伝子とc-myc関連遺伝子N-myc遺伝子中にあり、両遺伝子の発現の制御に関わっていると考えられる。一方、myc結合配列をもつプラスミッドを用いてトランスジェニックマウスを作製した。このマウス中でもmyc結合配列をもつプラスミッドは遊離状態で存在し、この配列がDNA合成開始点として働くことが動物個体のレベルでたしかめられた。(有賀)

The SV40 T antigen is produced in a variety of cellular proteins, and its temperature sensitivity varies from one protein to another. The amount of T antigen produced by these cells is determined by the amount of T antigen produced by these cells. In one aspect, the development of receptor genes such as tumor cells in retinal bud cells was observed in SV40 cells. (Sugano, Yu Yu) Normal line cell line 3Y1 Okayama This is the first time that a cell phone has been used in a cell phone system. The DNA sequence of the cells was analyzed. This cDNA fragment is SV40. It is expected to be active in normal cells. (Yamaguchi) SV40 T antigen is isolated from DNA fragments bound to c-myc protein and determined by binding site alignment. This sequence is the starting point of DNA synthesis and the activation of gene expression in the vicinity. The sequence of genes is very similar to that of hsp70 gene, c-myc gene and N-myc gene. A party, myc combination with the column to choose the right place to use the right place to choose the right place to choose In this case, the myc binding sequence exists in the free state, and the sequence begins at the starting point of DNA synthesis. (Ariga)