Regulation von Differnzierung und programmierten Zelltod neuraler und neuroektodermaler Systeme durch den Transkriptionsfaktor AP-2

转录因子 AP-2 调节神经和神经外胚层系统的分化和程序性细胞死亡

• 批准号: 5229400
• 负责人: Professor Dr. Reinhard Büttner
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Pathologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1999-12-31 至 2003-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5229400?language=en
• 关键词: Regulation; von; Differnzierung; und; programmierten

AP-2 Transkriptionsfaktoren spielen bei der embryonalen Entwicklung des Nervensystems des Neuroektoderms, der Haut und des Urogenitaltraktes eine essentielle Rolle. Neben der transkriptionellen Steuerung embryonaler Genexpressionsprogramme begrenzen AP-2 Proteine über eine direkte Wechselwirkung mit dem proto-Onkogen c-myc die Rate apoptotischer Zellen in embryonalen Geweben. Wir haben daher im Verlauf der vergangenen Förderungsperiode transkriptionelle und nicht-transkriptionelle Mechanismen untersucht, die die spezifischen embryonalen AP-2 Expressionsmuster regulieren. Im Rahmen dieser Arbeiten konnte erstens ein neues Zinkfinger-Protein, AP-2rep, isoliert werden, das die Expression von AP-2a mRNA transkriptionell reprimiert und zusammen mit dem Corepressor CTBP (C-terminal binding protein) ein neuartiges Prinzip der Repression embryonaler Genexpressionsmuster darstellt. Zweitens konnte ein neues F-Box Protein, MEHMET (murine embryonal homology-domain of methyltransferase) isoliert werden, das mit AP-2 direkt wechselwirkt und zu einer Proteasomen-vermittelten Degradation von AP-2 Proteinen führt. Ausgehend von diesen Befunden wollen wir nun durch die Herstellung von murinen Null-Mutanten die Funktionen von AP-2rep und MEHMET im Rahmen der embryonalen Entwicklung und der Regulation von AP-2 in vivo klären. Parallel dazu soll durch Zellkulturexperimente in vitro die Bedeutung der transkriptionellen Repression durch AP-2rep für die neuronale Differenzierung untersucht und weitere AP-2rep Zielgene isoliert werden. Diese Experimente sollen zudem die Funktion von AP-2rep im Rahmen der Erhaltung eines Apoptose-sensitiven, nichtransformatierten Zellphänotyps klären. Schließlich wollen wir durch die Herstellung stabiler Transfektanden mit induzierbaren MEHMET Expressionsklonen den Einfluß von MEHMET auf die endogene AP-2 Regulation, die Einleitung des programmierten Zelltodes sowie Proliferationsrate und Zellzyklus messen.

AP-2神经外胚层、上神经和泌尿生殖系神经系统的胚胎发育中的跨膜作用是一个重要的作用。胚胎转基因表达程序的启动使AP-2蛋白与原癌基因c-myc在胚胎中的表达率直接相关。我们已经在Verlauf der vergangenen Förderungsperiode transkriptionelle und nicht-transkriptionelle Mechanismen untersucht，die specifischen embryonalen AP-2 Expressionsmuster regulieren.本研究发现一种新的锌指蛋白AP-2 rep，它是一种韦尔登蛋白，能抑制AP-2a mRNA的表达，并与辅阻遏物CTBP（C-末端结合蛋白）结合，是一种抑制胚胎基因表达的新方法。两种新的F-Box蛋白，MEHMET（鼠胚胎甲基转移酶同源结构域）是一种韦尔登，它通过AP-2直接选择性降解并通过AP-2蛋白的蛋白酶降解而获得。我们可以通过对AP-2在小鼠体内的胚胎发育和调控机制的研究，对AP-2 rep和MEHMET在小鼠体内的作用进行研究。通过体外Zellkultureexperimente平行测定了通过AP-2复制对神经元的差异表达和其他AP-2复制Zielgene isoliert韦尔登的跨膜抑制。该实验研究了AP-2在一种对凋亡敏感的细胞中的作用，但没有发现明显的突变。我们希望通过诱导MEHMET表达的稳定性转移来影响MEHMET对内源性AP-2的调节，从而使Zelltodes的程序化表达和Zellzyklus表达更好。