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コイの補体第5成分(C5)の単離

鲤鱼补体成分 5 (C5) 的分离

基本信息

批准号：
01560211
负责人：
矢野友紀
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01560211/
关键词：
魚類コイ補体 C5 K-76COOH 補体成分免疫

项目摘要

補体は血液中に含まれる一連の酵素・タンパク質群であり、哺乳類ではC1からC9までの9成分からなることが知られている。著者らはコイ血清から、現在までに4成分(C1、C4、C2、C3)を検出・分離したが、本研究では、コイ補体に哺乳類のC5に相当する成分が存在するかどうかを明かにすることを目的とした。1.哺乳類のC5の特異的不活化剤であるK-76COOHがコイの補体活性(溶血活性)に及ぼす影響を調べたところ、古典経路、第2経路ともに阻害を受けた。著者らが先に単離したC3の活性は阻害を受けなかったので、K-76COOHはコイ補体のC3より後に反応する成分を不活化すると考えられ、C5相当成分の存在が示唆された。なお、50%阻害濃度は両経路とも約0.5mg/mlで、ヒト補体系の場合とほぼ同じであった。2.感作ヒツジ赤血球(EA)に、K-76COOHの存在下でコイ血清を作用させて得られた溶血中間複合体は、ヒドラジン処理コイ血清(C3とC4を欠く)と組み合わせると溶血した。したがって、このものは哺乳類のEAC1423に相当する複合体であると考えられた。3.上記EAC1423と1.5M KSCN処理コイ血清を組み合わせても溶血が起きないことから、KSCN処理血清はC5以降の成分を不活化していると考えられた。そこで、この組み合せを検出試薬として、コイ血清をセルロファインGC-700でゲル瀘過し、C5の分離を試みた結果、分子量5万付近の画分に溶血活性が認められた。4.今後この活性を示す成分が実際に哺乳類のC5に相当するものであるかを確認するために、免疫化学的な同定を試みる予定である。

Complement contains a series of enzymes in the blood, mammals, C1, C9, C9, The four components (C1, C4, C2, C3) of the mammalian complement C5 were identified and isolated. 1. Mammalian C5 specific inactivation agent K-76COOH regulates complement activity (hemolytic activity) and inhibits the classical pathway and the second pathway. The activity of C3 was inhibited by K-76COOH, and the activity of C3 was inhibited by K-76COOH. 50% of the concentration is about 0.5mg/ml, and the system is the same. 2. In the presence of EA and K-76COOH, the hemolytic intermediate complex was formed. EAC1423 is the equivalent of a mammalian complex. 3. EAC1423 and 1.5M KSCN treated serum C5 were not activated. The hemolytic activity of C5 was determined by GC-700 and the separation test results of C5. 4. In the future, the activity of C5 in mammals will be determined by immunochemical identification.