权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

耳下腺腺房細胞のサブスタンスP受容体の脱感作機構

腮腺腺泡细胞P物质受体的脱敏机制

基本信息

批准号：
01571031
负责人：
杉谷博士
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Nihon University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01571031/
关键词：
耳下腺サブスタンスP受容体脱感作リン酸化

项目摘要

ラット耳下腺腺房細胞をトリプシンとコラゲナ-ゼを用いて作成し、サブスタンスP受容体の同種脱感作機構において、サブスタンスP受容体蛋白質のリン酸化が関与するか否かについて検討し、次の結果を得た。1.サブスタンスPで前処理した細胞から膜分画をとり、〔^<125>I〕サブスタンスPの結合数およびアフィニティ-を測定した結果、サブスタンスPで前処理しない細胞からの膜分画に比べ、結合数のみが有意に減少していた。2.〔^<125>I〕サブスタンスPを腺房細胞の膜分画にジサクシニミジルサブレイト(DSS)を使用しクロスリンクさせ、SDS-PAGE電気泳動法によりサブスタンスP結合蛋白質を検討した結果、その分子量は約60,000であることを確認した。3.^<32>Pを取り込ませた腺房細胞を、サブスタンスP刺激し、その後膜分画を分離し、SDS-PAGE電気泳動法でリン酸化を検討したところ、サブスタンスP刺激によって、分子量60,000と33,000の蛋白質がリン酸化された。以上のことは、サブスタンス刺激によりその受容体がダウンレギュレ-トされることがサブスタンスP作用の脱感作の原因であり、さらにその過程に分子量約60,000のサブスタンス受容体がリン酸化される可能性を示している。さらに、このサブスタンスP受容体蛋白質は1.0%のCHAPSで腺房細胞の膜画分より可溶化することができた。現在、この分画でのサブスタンスP受容体蛋白質の性質を検討中であり、この蛋白質への〔^<125>I〕サブスタンスPのクロスリンクを試みており、また、この蛋白質のリン酸化を得ることにより、より直接的なリン酸化の関与の証明になるものと思われる。

The results of this study were as follows: 1. The relationship between protein acidification of receptor protein and the formation of allo-desensitizing mechanism of receptor protein was studied. 1. The number of binding sites in the cell membrane before treatment is intentionally reduced<125>. 2. [^<125>I] The molecular weight of P-binding protein was confirmed to be about 60,000 by SDS-PAGE electrophoresis. 3.^ <32>P was isolated from glandular cells, stimulated by P, separated from membrane by SDS-PAGE electrophoresis, and acidified by protein with molecular weight of 60,000 and 33,000. The above results indicate the possibility of acidification of a receptor with a molecular weight of about 60,000. In addition, the protein content of the receptor was reduced to 1.0% of CHAPS, and the membrane composition of the glandular cells was reduced to 1.0% of CHAPS. Now, this paper discusses the properties of the protein in the protein receptor. It is proposed that the protein receptor protein should be acidified directly and proved<125>.