重酸素標識体を利用する胆汁酸体内動態測定法の開発

开发使用重氧标记测量胆汁酸药代动力学的方法

基本信息

  • 批准号:
    01571173
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.22万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    1989
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1989 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

本研究は、生物学的同位体効果のきわめて小さい重酸素(^<18>O)で標識した胆汁酸を用いるトレ-サ-法と、感度、分離能、選択性に優れる負イオン検出ガスクロマトグラフィ--マスクペクトロメトリ-(GC/MS)とを組み合わせた胆汁の体内動態測定法を確立することを目的とした。まず、ステロイド核上7aおよび12a位に^<18>Oを標識した3-オキソ胆汁酸を調整した。コ-ル酸をFetizon酸化で3-オキソ体とした後、これをエチレンケタ-ルとして保護し、7および12位を常法通り無水クロム酸で酸化してジオキソ体に誘導した。ついでこれをカリウム塩に導き、H_2^<18>O中90℃、50時間加温してカルボニル酸素の交換反応に付した後、NaBH_4で還元し、3位保護基を除去した〔7,12-^<18>O_2〕3-デヒドロコ-ル酸を調整した。ひきつづき、血中における胆汁酸3位カルボニル基の還元活性に検討を加えた。本標識体あるいはこれと非標識体との1:1混合物をヒト血液または赤血球画分とインキュベ-ト後、胆汁酸を液・液抽出し、さらに疏水性イオン交換ゲルPHP-LH-20で精製した。ついでペンタフルオロベンジルエステル-トリメチルシリルエ-テルに誘導し、負イオン検出GC/MS分析に付した。その結果、3β-ヒドロキシ体の生成が確認された。一方、熱処理した血液、あるいは白血球、血小板画分では還元成績体は全く認められず、本還元反応が酵素的であり、しかもその活性は赤血球画分に局在することが判明した。因みに、本酵素反応において^<18>O標識体の生物学的同位体効果は全くないことが確認された。以上、肝、腸以外に新たな胆汁酸代謝の場が存在することをはじめて証明するとともに、^<18>O標識体と負イオン検出GC/MSの組み合わせが胆汁酸の代謝研究にきわめて有用なことを立証した。
In this study<18>, we established a method for the determination of bile acid in vivo by using a biological isotope method, sensitivity, separation energy and selectivity. 3<18>-D Bile Acid Adjustment 3-position Fetion Acidification 7-position Fetion Acidification 3-position Fetion Acidification 7-position Fetion Acidification 3-position Fetion Acidification After heating in H_2O <18>at 90℃ for 50 hours, NaBH_4 was reduced to a low level, and the 3-position protective group was <18>removed. 3-position of bile acid in the blood The marker is a 1:1 mixture of blood, red blood cells, bile acids, liquid extraction, hydrophobic exchange, PHP-LH-20 purification. In addition, the GC/MS analysis was performed by the GC/MS system. The results of this study confirmed the formation of 3β-tert-butoxide. A party, heat treatment of blood, white blood cells, platelet count, cell count, cell Because of this, the <18>enzyme is identified as a biological isotope of the marker. A new field of bile acid metabolism exists outside the liver and intestine, and it is proved that a new field of bile acid metabolism exists outside the liver<18>.

项目成果

期刊论文数量(3)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
R.Dumaswala: "Identification of 3α,4β,7α-trihydroxy-5β-cholanoic Acid in Human Bile" J.Lipid Res.30. 847-856 (1989)
R. Dumaswala:“人胆汁中 3α,4β,7α-三羟基-5β-胆烷酸的鉴定”J.Lipid Res.30 (1989)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Masashi Yoneda: "The Biotransformed Metabolite Profiles in Blood after Intravenous Administration of Dehydrocholic Acid" Am.J.Gestroentero. 84. 290-295 (1989)
Masashi Yoneda:“静脉注射脱氢胆酸后血液中的生物转化代谢物概况”Am.J.Gestroentero。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Junichi Goto: "Reductive Biotransformation of 3-Oxo Bile Acids in Human Blood" Chem.Pharm.Bull.37. 1960-1962 (1989)
Junichi Goto:“人体血液中 3-氧代胆汁酸的还原生物转化”Chem.Pharm.Bull.37。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
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  • 作者:
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  • 通讯作者:
    南原 利夫

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    $ 1.22万
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    $ 1.22万
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  • 财政年份:
    1988
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    $ 1.22万
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  • 财政年份:
    1983
  • 资助金额:
    $ 1.22万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)

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知道了