プロテインホスファタ-ゼによる発癌プロモ-ション過程の解析

蛋白磷酸酶促癌过程分析

• 批准号: 02152001
• 负责人: 菊池 九二三
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02152001/
• 关键词: プロテインホスファタ-ゼ; ラットPP1α; cDNA; 肝化学発癌; 腹水肝細胞; ノザンブロット

癌遺伝子産物の多くが蛋白リン酸化を介する機能蛋白であることやプロテインホスファタ-ゼの阻害剤オカダ酸に発癌プロモ-タ-作用があることが見いだされ,プロテインホスファタ-ゼの発癌過程での意義が注目されている.そこでわれわれは発癌過程における本酵素の遺伝子発現について検討した.すでにわれわれはラットライブラリ-より本酵素の2分子種PP2AとPP2Cの分子クロ-ニングを終えているので,本研究ではまず,ラットPP1の分子クロ-ニングを行い,次いでこれらをプロ-ブとして用いて遺伝子発現を解析した.まず得られたcDNAは全長1415bpで,その全塩基配列の決定を完了した.塩基配列を見ると,5'および3'側にそれぞれ68および360bpの非翻訳領域があり,翻訳領域は990bpで330アミノ酸残基からなる蛋白をコ-ドし,これから算出される分子量はSDSーPAGEから得られる値37KDaと一致した.これをすでに報告されているウサギPP1αの結果と比較すると,塩基配列で全体で85%,翻訳領域で88%の相同性が示された.ところがアミノ酸配列でみると両者は完全に一致していることがわかった.したがって本酵素分子種PP1αのアミノ酸配列は種を越えて保存されていることが結論された.次にこのようにして得られたcDNAをプロ-ブにして,正常肝および腹水肝癌AH13でノザンブロットにより遺伝子発現を調べた.AH13では,PP1αのmRNAレベルは正常肝の約13倍の発現上昇が認められた.ところが再生肝についてみると,術後明らかな上昇は認められるが,上昇レベルは正常の2倍弱であった.次にSoltーFarberの発癌系では,DEN投与後PP1αmRNAの上昇が認められ,過形成結節がみられる5週目にピ-クに達した.PP2AとPP2Cについても類似の上昇が観察されたが,反応性には差異が認められた.

The significance of functional proteins involved in the acidification of multiple oncoprotein products in the development of cancer is noted. The enzyme gene expression in the process of cancer development was detected. In this study, we analyzed the molecular evolution of two molecular species PP2A and PP2C of this enzyme. The full length cDNA was 1415bp, and the complete nucleotide sequence was determined. The amino acid residues were 68 bp and 360bp in the 5 'and 3' sides of the protein, and the amino acid residues were 330 bp and 990bp in the inverted domain. In this report, 85% of the total number of base pairs and 88% of the total number of reverse pairs were identified. The two of them are completely identical. The enzyme molecule PP1α was found to be resistant to acid binding. The expression of PP1 α mRNA in AH13 was increased approximately 13-fold compared with that in normal liver. After surgery, the liver regeneration will increase, and the liver regeneration will increase. PP1 αmRNA increased after DEN administration, and PP2A and PP2C mRNA increased after 5 weeks of DEN administration.

项目成果

Takeo Yano: "Phosphorylation of Keratin Intermediate Filaments by Protein Kinase C,by CalmodukinーDependent Protein Kinase and by cAMPーDependent Protein Kinase." Eur.J.Biochem.(1991)

Takeo Yano：“蛋白激酶 C、钙调蛋白依赖性蛋白激酶和 cAMP 依赖性蛋白激酶对角蛋白中间丝的磷酸化。Eur.J.Biochem.(1991)

Kazuki Kitamura: "Molecular Cloning and Sequence Analysis of cDNA for the Catalytic Subunit 1_α of Rat Kidney Type 1 Protein Phosphatase,and Detection of the Gene Expression at High Levels in Hepatoma and Regenerating Livers as Compared to Rat Livers." J.

Kazuki Kitamura：“大鼠肾 1 型蛋白磷酸酶催化亚基 1_α cDNA 的分子克隆和序列分析，以及与大鼠肝脏相比肝癌和再生肝脏中高水平基因表达的检测。”

Kunimi Kikuchi: "Characterization of Protein Phosphatases Associated with the Particulate Fraction from Rat Liver." Tohoku J.Exp.Med.160. 287-300 (1990)

Kunimi Kikuchi：“与大鼠肝脏颗粒部分相关的蛋白磷酸酶的表征。”

菊池 九二三: "プロテインホスファタ-ゼ研究の最近の進歩。" 蛋白質核酸酵素. 36. 137-147 (1991)

Kikuchi, K.：“蛋白质磷酸酶研究的最新进展。” 36. 137-147 (1991)