Srcファミリ-遺伝子fynのリンホ-マ並びに正常リンパ球における発現と機能

Src家族基因fyn在淋巴瘤和正常淋巴细胞中的表达及功能

• 批准号: 02152030
• 负责人: 片桐 拓也
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02152030/
• 关键词: Srcファミリ-; fyn; チロシン燐酸化酵素; lpr; Tリンパ球; T細胞抗原レセプタ-; 遺伝子導入

srcファミリ-遺伝子fynの発現制御機構と、その産物p59^<fyn>チロシンキナ-ゼ(fyn)の生理的機能を解析して以下の知見を得た。(1)発現:lprマウスで腫大リンパ節を構成する異常Tリンパ球においては、正常Tリンパ球に比べて約15倍のfyn mRNAの増大が認められるが、nuclear run on assayとactinomycinDを用いたfyn mRNA代謝速度の検定結果から、Iprリンパ球ではfyn nRNAのstabilityが増大していることが判明した。一方、活性化正常Tリンパ球に認められる一過性誘導発現では、核における転写量が増大していた。更に現在、前年度見だした前駆Bリンパ球におけるfynの高レベル発現がいずれの機序によるか検討している。(2)機能:免疫沈降法とin vitro kinase assayとを組み合わせることによって、FynがTリンパ球抗原レセプタ-(TcR)と会合していることを見出した。このことはTcRと共にdown modulationされることからも示唆され、またFynの5乃至10%がTcRに会合していた。TcRへの会合量はlprTリンパ球では正常の2.5倍であり、リンパ腺腫脹の形成との関連が示唆された。このlprTリンパ球においては、活性化Tリンパ球と同様にTcRのシグナル伝達分子CD3ζ鎖が構成的にチロシン燐酸化されているが、CD3ζ遺伝子とfynとのcoーtransfectionの系を用いて、CD3ζがFynの基質になり得ることが示された。更にlprTリンパ球でGAP(GTPaseーactivating protein)のチロシン燐酸化も判明し、Fynを介した伝達系の一端が明らかとなった。TcRに会合するFynの機能を知るため、現在更に、作成した種々の活性型及び不活性型fynを導入発現させた抗原特異的T細胞ハイブリド-マの反応性を解析している。

The <fyn>physiological function of src gene fyn was analyzed and the following results were obtained. (1)Fyn mRNA increased approximately 15-fold compared with normal T lymphocyte. The results of the estimation of the metabolic rate of fyn mRNA in the presence of actinomycin D showed that the stability of fyn nRNA increased. On the other hand, the activity of normal T cells is gradually increased due to transient induction. In addition, the current and previous years have seen the development of new technologies and new technologies. (2)Function: Immuno-sedimentation assay and combination of TcR and Fyn. This time, TcR and TcR will be down modulated together, and Fyn's 5 to 10% will be combined with TcR. TcR concentration is 2.5 times higher than normal, and the relationship between TcR concentration and TcR concentration is discussed. This is the first time that the TcR gene has been activated, and the TcR gene has been activated, and the CD3 gene has been activated, and the CD3 gene has been transformed into the Fyn gene. In addition, the phosphorylation of GAP(GTase activating protein) was identified and Fyn was detected at one end of the system. The function of TcR fusion Fyn is known, and now it is produced. The active and inactive Fyn are introduced into the T cells and analyzed.

项目成果

<Semba,K.>___ー and Toyeshima,K.: "Genes and Cancer, Structure and function of srcーfamily kinases" John Wiley and Sons,England, T73-T83 (1990)

<Semba,K.>___ 和 Toyeshima,K.：“基因与癌症、src 家族激酶的结构和功能”John Wiley and Sons，英格兰，T73-T83 (1990)

Katagiri,K.,<Katagiri,T.,>___ー Yamamoto,T.,and Yoshida,T.: "Expression of src family genes during monocytic differentiation of HL60 cells." J.Immunol.(1991)

Katagiri, K., <Katagiri, T.,>___- Yamamoto, T. 和 Yoshida, T.：“HL60 细胞单核细胞分化过程中 src 家族基因的表达”(1991)。

Takahashi,T.,Semba,K.,Yamamoto,T.,and <Katagir,T.>___ー: "Constitutive and inductive expression of protein ーtylosine kinase p59^<fyn> in T lymphocytes."

Takahashi, T.、Semba, K.、Yamamoto, T. 和 <Katagir, T.>____：“T 淋巴细胞中蛋白质 - 泰乐氨酸激酶 p59^<fyn> 的组成型和诱导表达。”

Takahashi,T.,Takemori,T.,Yamanashi,Y.,Yamamoto,T.,and <Katagiri,T.>___ー: "Expression of p59^<fyn> tyrosineーkinase in B cell ontogeny."

Takahashi,T.、Takemori,T.、Yamanashi,Y.、Yamamoto,T. 和 <Katagiri,T.>___ー：“p59^<fyn> 酪氨酸激酶在 B 细胞个体发育中的表达。”

<Katagiri,T.>___ー,Kurokawa,A.,Yamanashi,Y.,Semba,K.,and Yamamoto,T.: "Enhanced association of p59^<fyn> tyrosineーkinase with Tーcell antigen reccptor in lpr CD4^ー CD8^ー T cells."

<Katagiri, T.>___ー、Kurokawa, A.、Yamanashi, Y.、Semba, K. 和 Yamamoto, T.：“p59^<fyn> 酪氨酸激酶与 T 细胞抗原受体的增强关联lpr CD4^ー CD8^ー T 细胞。"