高転移性細胞に対するIGFーIの作用の解析

IGF-I对高转移细胞的影响分析

• 批准号: 02152122
• 负责人: 矢守 隆夫
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Japanese Foundation For Cancer Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02152122/
• 关键词: 癌転移; 増殖因子; IGFーI; インスリン様増殖因子I; シグナル伝達; 高転移性細胞; チロシンリン酸化; チロシンキナ-ゼ

マウス結腸癌colon26由来の高転移性NLー17細胞の増殖は、インスリン様増殖因子I(IGFーI)により顕著に促進される。本研究では、IGFーIのNLー17細胞への作用機作を解析した。対照として、低転移性でかつIGFーIに対する反応性の弱いNLー44細胞を用いた。 ^<125>I標識IGFーIを用いた結合実験およびIGFーIレセプタ-のアフィニティ標識の結果IGFーIレセプタ-の発現量とそのIGFーIへのアフィニティは、NLー17とNLー44細胞で差は認められなかった。また、IGFーIレセプタ-の自己リン酸化能も両者で差は見られなかった。抗リン酸化チロシン抗体により、IGFーI依存性にチロシンリン酸化される蛋白を解析した結果、NLー17細胞では150kDaおよび160kDa(pp150/160)の蛋白に顕著なリン酸化が認められ、このリン酸化の程度は、NLー44細胞に比べ有意に高いことが判明した。この反応はIGFーIの特異的で、IGFーI添加後10秒以内におこる。pp150/160は細胞の可溶性画分に存在し、Ca^+はその局在性に影響しなかった。これらの精製のためにモノクロ-ナル抗リン酸チロシン抗体25・2G2産生ハイブリド-マを樹立、この抗体でアフィニティカラムを作製した。このカラムにより、pp150/160は効率よく濃縮、精製された。微量混入蛋白を除くため、さらに精製中である。以上、高転移性NLー17細胞におけるIGFーIのシグナル伝達の解析から、IGFーIによる2つのユニ-クな蛋白(pp150/160)のチロシンリン酸化が明らかとなった。これらの蛋白は、NLー17細胞におけるIGFーIレセプタ-キナ-ゼの細胞内基質であり、IGFーIシグナルの伝達に関与すると考えられた。NLー17とNLー44細胞との比較から、両者のIGFーIへの反応性の違いは、IGFーレセプタ-の発現量あるいはそのチロシンキナ-ゼ活性ではなく、pp150/160のリン酸化レベルの差によるものと推察された。また、アフィニティカラムによりpp150/160の部分精製に成功した。

The proliferation of highly migratory NL-17 cells derived from colon cancer is promoted by growth factor I(IGF I) In this study, we analyzed the mechanism of IGF-1 and NL-17 cells. For example, the low mobility of IGF-I and NL-44 cells can be used. ^<125>"IGF-1" is used in combination with IGF-1, NL-17, NL-44, and IGF-1. The IGF-1 gene has been found to be able to stimulate the growth of human beings. The results of protein analysis of anti-CRP antibody and IGF I-dependent CRP showed that the protein of NL17 cells was 150kDa to 160kDa(pp150/160), and the degree of CRP acidification was significantly higher than that of NL44 cells. The IGF I is unique and can be added within 10 seconds. pp150/160 The soluble fraction of the cell exists, Ca^+ is affected by the nature. 25·2G2 Production of anti-acid antibody 25·2G2 This is the first time that we've seen this. Trace amounts of mixed protein are removed and refined. The above, highly migratory NL-17 cells, IGF-1, IGF-2, IGF-3, IGF-3, IGF-4, IGF-3, IGF-4, IGF-4, IGF-5, IGF-6, IGF-7, IGF-4, IGF-5, IGF-5, IGF-6, IGF-7, IGF-8, IGF-7, IGF-7, IGF-8, IGF-7, IGF-9, IGF-9, IGF-2, IGF-7, IGF-8, IGF-7, IGF-8, IGF-8, IGF-9, IGF-2, IGF-7, IGF-8, IGF-7, IGF-9, IGF-8, IGF-9, IGF-7, IGF-8, IGF-9, IGF-9 The expression of IGF-1 in NL-17 cells is related to the expression of IGF-1 in intracellular matrix. NL-17 and NL-44 cells were compared with each other, and the IGF-1 activity of the IGF-1 receptor was detected. Pp150/160 and partial refinement were successful.

项目成果

Takao Yamori: "Insuline like growth factor I(IGFーI)rapidly induces tyrosine phosphorylation of 150 kDa and 160 kDa proteins in highly metastatic mouse colon carcinoma 26 NLー17 cells."

Takao Yamori：“高度类似生长因子 I (IGF-I) 的胰岛素可快速诱导转移性小鼠结肠癌 26 NL-17 细胞中 150 kDa 和 160 kDa 蛋白的酪氨酸磷酸化。”

Keisuke Yusa: "Low metastatic potential of clone from murine colon adenocarcinoma 26 increased by transfection of activated cーerbBー2 gene." J.Natl.Cancer Inst.82. 1663-1636 (1990)

Keisuke Yusa：“通过转染激活的 cerbB-2 基因，小鼠结肠腺癌 26 的克隆的低转移潜力增加。”J.Natl.Cancer Inst.82 (1990)。

矢守 隆夫: "癌転移と増殖因子" 蛋白質・核酸・酵素. (1991)

Takao Yamori：“癌症转移和生长因子”蛋白质、核酸和酶（1991）。

矢守 隆夫: "続医薬品開発 7 医薬品開発とバイオテクノロジ-:癌転移阻害物質の検索" 広川書店, 182 (1991)

Takao Yamori：“持续药物开发7药物开发和生物技术：寻找癌症转移抑制剂”广川书店，182（1991）