ボツリヌス神経毒素による神経伝達物質放出機構の解析

肉毒杆菌神经毒素释放神经递质机制分析

• 批准号: 02806054
• 负责人: 首藤 文栄
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02806054/
• 关键词: ボツリヌス毒素; 神経毒素; シナプトソ-ム; 毒素結合性物質

この研究の目的は、ボツリヌス神経毒素の神経伝達物質放出阻害作用を利用して、神経終末前膜における伝達物質放出機構を分子レベルで解明することである。神経情報受容・細胞内伝達系にはG蛋白質を含む制御系が存在するが、神経伝達物質の放出にも類似の系が存在する可能性がある。それを確かめるための第一段階として、毒素分子反応性物質の分離精製を試みた。1.分離したラット脳シナプトゾ-ムを、1%コ-ル酸ナトリウムで可溶化し、10,000xgで遠心分離して可溶性画分と不溶性画分に分けた。2.可溶性画分をToyopearl HWー50sでゲル濾過し、巨大分子と低分子の2種類の画分を得た。両画分とも、毒素分子と結合する活性を持っていた。これらの画分を、毒素とともにマウスに注射すると、前者は、毒素活性を上昇させ、後者は、抑制した。前者を毒素活性化画分、後者を毒素抑制画分と名付けた。3.毒素活性化画分は、分子量20万以上のタンパク質数種類とガングリオシドの複合体であり、毒素抑制画分は、ガングリオシドを含まない、分子量2ー4万の低分子糖タンパク質群であった。4.毒素活性化画分を、CMーToyopearl 650Mでさらに分画すると、毒素活性を上昇させる活性は失われたが、再混合するとその活性が回復した。毒素抑制画分をCMーToyopearl 650Mで分画したところ、3種類の画分が得られ、その中の1つは、比活性が50倍以上に上昇していた。現在、毒素抑制画分の分子構成を解析解析している。6.今後、この画分の中にGTP結合タンパク質が含まれているかどうか、毒素活性を抑制する機構は何か、さらに、ラット脳シナプトゾ-ムでどのような機能を果たしているのかを解析して行く予定である。

The purpose of the study is to determine the release of toxins, the release of toxic substances, the use of drugs, and the release of compounds from the anterior membrane of the body. The emotional tolerance of the intracellular protein G protein contains the presence of the royal system, and the possibility of the release of the system. Please make sure that in the first paragraph, the anti-toxic substances of toxin molecules are separated from each other. 1. Separate samples from different parts of the body, 1% acid, 1% acid, soluble, 10000xg, soluble, insoluble, and insoluble. two。 The soluble painting scores of Toyopearl HW 50 s and macromolecular low molecular weight 2 were higher than that of the others. Draw the fractionation, the toxin molecule combined with the activity of the toxin to maintain the concentration. The toxins are divided, the toxins are injected, the former, the activity of the toxins, the latter, and the inhibition. The former is marked by the activation of toxins, and the latter by name. 3. Activation of toxin, molecular weight of more than 200000, molecular weight of more than 200000, molecular weight of more than 40, 000, low molecular weight, low molecular weight, molecular weight and molecular weight. 4. The activity of toxin was divided into four parts: CM, Toyopearl 650m, and so on. The activity of toxin, the activity of toxin and the activity of toxin were analyzed. The toxin inhibition picture is divided into CM, Toyopearl 650m, 3, 1, and 50 times the specific activity. At present, toxin inhibition is divided into molecules, analysis, analysis and analysis. 6. In the future, the combination of the GTP and the information system contains the information about the activity of the toxin, the activity of the toxin and the activity of the mechanism. in the future, the combination of the GTP and the system contains information on the activity of the toxin and the activity of the toxin.

项目成果

Bunei SYUTO: "Isolation and characterization of botulinum S toxinーbinding proteins from rat brain synaptosomes" J.Biochem.

Bunei SYUTO：“大鼠脑突触体中肉毒杆菌 S 毒素结合蛋白的分离和表征”J.Biochem。