グラム陽性菌におけるタンパク質分泌機構、特に分泌装置の遺伝子に関する解析

革兰氏阳性菌蛋白质分泌机制尤其是分泌器基因分析

• 批准号: 02660106
• 负责人: 吉川 博文
• 金额: $ 0.83万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02660106/
• 关键词: 蛋白質の膜透過; 膜蛋白質; 枯草菌; 蛋白質分泌機構; 胞子形成

1.枯草菌スペクチノマイシン耐性遺伝子を含む断片をクロ-ニングし塩基配列を決定した結果、リボソ-ムタンパク質S5に続いて、L30、L15,SecYの各遺伝子が相同性から確認された。また、遺伝子の配列も大腸菌と同じであった。しかし、SecYの下流は大腸菌と異なっており、アデニル酸キナ-ゼ(AdK)の遺伝子が続いていた。2.SecY蛋白質は、疎水性・親水性プロットが大腸菌のものと非常によく似ており、やはり膜蛋白質であることが予想される。また、アミノ酸配列で特に相同性の高い領域が7ケ所存在するが、その領域は膜貫通ドメインか細胞質側ドメインに局在しており、その機能の普遍性をうかがわせる。3.変異剤処理によってsecY遺伝子の変異により、胞子形成が温度感受性になった株を得た。この株は37℃では正常に胞子形成を行なうが、45℃では胞子形成率が10^<ー4>程度に落ちている。また、形質転換時の組換え能も、野生株に比べて、10^<ー2>以下に低下している。4.今回得られたsecY遺伝子領域のみをプロ-ブとして、他の生物種についてサザンハイブリダイゼ-ションによる解析を行なったところ、黄色ブドウ球菌において強いシグナルが観察された。また、クロストリジウムや各種のらん藻類においても、弱いながらもシグナルが得られた。5.枯草菌チオストレプトン耐性の遺伝子を、同様の方法でλg+11上にクロ-ニングした。塩基配列の解析の結果、リボソ-ム蛋白質L11の遺伝子が確認できた。現在、近接領域の塩基配列を決定し、secE相当遺伝子を採している段階である。

1. The results of the determination of the gene alignment of the resistant genes of Bacillus subtilis showed that the genes of S5, L30, L15 and SecY were identical.また、遗伝子の配列も大肠菌と同じであった。しかし、SecYの下流は大肠菌と异なっており、アデニル酸キナ-ゼ(AdK)の遗伝子が続いていた。2. SecY protein, water, hydrophilicity, etc. There are 7 domains of high identity in the acid sequence, and there are 7 domains of high identity in the membrane penetration, and there are 7 domains of high identity in the cytoplasm. 3. Different treatment methods for different seed types, spore formation and temperature sensitivity This plant has a normal spore formation rate of 37 ℃ and a spore formation rate of 10 ℃. In addition, when the physical quality changes, the composition can be changed, and the wild plant is lower than that of the wild plant, 10 ^<2>. 4. This paper reports the results of the analysis of the sub-domains of the three species, namely, the yellow and yellow species, and the analysis of the sub-domains of the three species. All kinds of algae are found in different places. 5. The method of resistance gene expression of Bacillus subtilis is the same as λ g +11. The results of nucleotide alignment analysis and identification of protein L11 were analyzed. Now, the base arrangement of the adjacent field is determined, and the secE corresponding to the transmission is selected.

项目成果

H.Yoshikawa: "Sequence of the Bacillus subtilis spectinomycin resistance gene region." Nucleic Acids Res.18. 1647-1647 (1990)

H.Yoshikawa：“枯草芽孢杆菌大观霉素抗性基因区域的序列。”

H.Yoshikawa: "Bacillus subtilis SecY protein is required for sporulation."

H.Yoshikawa：“枯草芽孢杆菌 SecY 蛋白是孢子形成所必需的。”

K.Nakamura: "Cloning and characterization of a Bacillus subtilis gene homologous to E. coli secY." J.Biochem.107. 603-607 (1990)

K.Nakamura：“与大肠杆菌 secY 同源的枯草芽孢杆菌基因的克隆和表征。”