14N,23Na,31P NMRによる唾液腺細胞の緩衝能の研究

14N,23Na,31P NMR研究唾液腺细胞的缓冲能力

• 批准号: 02670042
• 负责人: 村上 政隆
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Okazaki National Research Institutes
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02670042/
• 关键词: 細胞緩衝能; 細胞内PH; 細胞内アンモニウム; 細胞内Na; NMR(多核); 唾液腺; アンモニウムパルス実験

本研究は、灌流ラット顎下腺を用い、核磁気共鳴法で唾液腺細胞の緩衝能とNa流入量、H流出量の関係について明かにし、Na/H交換輸送の緩衝能への寄与を推定する目的で実施された。1)31P NMR(核磁気共鳴)で細胞内無機燐の化学シフトから細胞内pHを連続的に測定した。アルカリ負荷として塩化アンモニウム(20mM)を与えると細胞内pHは急速に5分で0.5pHunit上昇し、その後塩化アンモニウム負荷中、細胞内pHは低下し、静止レベル以下になった(20分でpH6.6にまで低下)。これは、物理化学的な緩衝以外の細胞性の緩衝機能が活性化したことを示した。2)塩化アンモニウムを負荷すると、細胞内外のアンモニウムイオンはすみやかに平衡に達すると仮定されてきた。今回はじめて、この細胞内外のアンモニウムを14N NMRを用い経時的に測定することができた。塩化アンモニウム(20mM)を与えると細胞内アンモニウムイオンはすみやかに増加し、細胞内液あたり60mM濃度に達した。細胞内のアンモニウムイオンのNMR法による定量の為には緩和時間のpH依存性、常磁性イオンなど想定される細胞内環境の変化による影響を調べるために基礎実験を行った。3)細胞内に大量にアンモニウムイオンが流入するときに、通常分泌が行われるときに輸送されているNa,Kなどの輸送は影響をうけているのかどうかを23Na 39K NMRにより、細胞内Na量、K量の変化を測定しはじめたが、アンモニウムイオンが流入するときこれらのイオンが大量に膜を横切り輸送されていることが明かになった。Na/H輸送阻害剤を与えると、アンモニウム負荷による細胞内Na増加が抑制されることから、Na/H交換輸送系の寄与が存在することが明かになった。今回の結果は唾液腺細胞の緩衝能を測定する目的より出発し、アンモニウム負荷時にアンモニアイオンがアンモニアとして細胞膜を横切るのみならずイオンとしても輸送されることが示唆された。

In this study, perfusion, perfusion, subglandular injection, nuclear magnetic resonance (NMR), salivary gland cytolysis, Na inflow, H efflux, H efflux, Na/H delivery and presumption were studied. 1) 31p NMR (Nuclear Magnetic Resonance Co-operation) was used to determine the molecular weight of the intracellular pH link. The concentration of intracellular pH (20mM) and intracellular pH (pH6.6) were 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5% In addition to the physics and chemistry of physics and chemistry, non-cellular machines can be activated to show performance. 2) to determine the balance between intracellular and extracellular

项目成果

E.Suzuki,M.Maeda,S.Kuki,M.C.Steward,H.Takami,Y.Seo,M.Murakami,H.Watari: "Adenosine triphosphate compartmentation in the rat heart: A 31P spinーlattice relaxation study." J.Biochem.107. 559-562 (1990)

E.Suzuki、M.Maeda、S.Kuki、M.C.Steward、H.Takami、Y.Seo、M.Murakami、H.Watari：“大鼠心脏中的三磷酸腺苷区室：31P 自旋晶格弛豫研究。” .生物化学.107.559-562（1990）

Y.Seo,M.Murakami,E.Suzuki,S.Kuki,K.Nagayama,H.Watari: "NMR characteristics of intraーcellular K in the rat salivary gland: A 39K study using double quantum filtering." Biochemistry. 29. 599-603 (1990)

Y.Seo、M.Murakami、E.Suzuki、S.Kuki、K.Nagayama、H.Watari：“大鼠唾液腺细胞内 K 的 NMR 特征：使用双量子过滤的 39K 研究。” .599-603 (1990)

T.Hiraishi,Y.Seo,M.Murakami,H.Watari: "Detection of Biexponentiar relaxation in intracellular K in the rat heart by doubleーquantum 39K NMR." J.Magn.Reson.87. 169-173 (1990)

T.Hiraishi、Y.Seo、M.Murakami、H.Watari：“通过双量子 39K NMR 检测大鼠心脏细胞内 K 的双指数弛豫。”J.Magn.Reson.87（1990）。

Y.Seo,M.Murakami,H.Watari: "Measurement of intracellular Na in the rat salivary gland: A 23Na NMR study using double quantum filtering." Biochim.Biophys.Acta. 1034. 142-147 (1990)

Y.Seo、M.Murakami、H.Watari：“大鼠唾液腺细胞内 Na 的测量：使用双量子过滤的 23Na NMR 研究。”

I.Koizuka,M.Sano,T.Kubo,T.Matsunaga,Y.Seo,M.Murakami,H.Watari,O.Ishikawa,H.Ohkawara: "MRIによる側頭骨標本を用いた内耳の撮影." 耳鼻臨床. 83. 549-555 (1990)

I. Koizuka、M. Sano、T. Kubo、T. Matsunaga、Y. Seo、M. Murakami、H. Watari、O. Ishikawa、H. Ohkawara：“使用 MRI 颞骨标本对内耳进行成像。” 83. 549-555（1990）