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低酸素負荷によるラット脳内カルシウム依存性タンパクリン酸化酵素の変動

缺氧应激导致大鼠脑内钙依赖性蛋白激酶的变化

基本信息

批准号：
02670100
负责人：
谷口隆之
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Kyoto Pharmaceutical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

低酸素負荷ラットを長時間飼育し、脳内カルシウム依存性タンパクリン酸化酵素(protein kinase C)の変動を検討した。ラットを低酸素チャンバ-中で、5%O_2、95%N_2下30分間飼育した後、室内気で飼育し、各時間ごとに大脳皮質、海馬、線状体に別けた。各部位につき、膜分画、細胞質分画、核分画に別け、protein kinaseCの調節部位に結合する ^3Hーphorbolー12,13ーdibutyrate(PDBu)を用いて結合実験を行ない、protein kinase Cの変動を定量的に測定した。その結果、最も変動の顕著な海馬においては、室内気中に取り出した直後(0分)では、protein kinaseC量に変化は認められなかったが、30分、1時間では膜分画、細胞質分画で減少が認められ、3時間後では元のレべルに回復し、12時間後までは変動が認められなかった。一方、核分画においては、12時間のいずれの時間においても変動は認められなかった。以上の結果より、少なくとも12時間までの早い時期において、海馬のprotein kinase C量は、膜分画、細胞質分画共に一過性に減少し、核分画でのprotein kinase C量に変化がなかったことから、translocationは生じていない可能性が示唆された。現在、1日目、2日目、7日目の変動を検討中であるが、これらの遅い時期でのprotein kinase C量の変動は、早い時期の変動と異なる可能性を示すデ-タが出つつある。また、protein kinase C isozymeの抗体を用いて、Western blottingを行い、早い時期のprotein kinase Cの変動に、どのisozymeがかかわっているのかも現在検討中であり、もうすぐ結論が出ると思われる。

Low acid load, long-term incubation, and internal regulation of protein kinase C activity After 30 minutes of incubation under 5%O_2 and 95%N_2, the cortex, hippocampus and linear body of the brain were separated at different time points. ^3H-phorbol-12,13-dibutyrate(PDBu) is used to bind to each site, membrane segmentation, cytoplasm segmentation, and nuclear segmentation, and to bind to the regulatory site of protein kinase C, and to quantify changes in protein kinase C. The results showed that the most active hippocampus was recovered, and the protein kinase C content was reduced after 0 minutes. The membrane and cytoplasm were reduced after 1 time. The original hippocampus was recovered after 3 time. The protein kinase C content was changed after 12 time. A party, a nuclear division of the painting, 12 time in the middle of the time, the time in the middle of the movement, the recognition The above results show that protein kinase C content in hippocampus, membrane and cytoplasm decreased transiently, protein kinase C content in nucleus decreased transiently, and the possibility of translocation increased. Changes in protein kinase C levels during the current, 1-day, 2-day, and 7-day periods are discussed. Changes in protein kinase C levels during the early and middle periods are possible. Protein kinase C isozyme antibody use, Western blotting, protein kinase C activity in early stages, isozyme use in early stages, and isozyme use in early stages.