Charakterisierung und Isolierung des Na+/Mg2+-Austauschers

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Für das Vormagenepithel der Hauswiederkäuer konnte sicher nachgewiesen werden, daß Mg2+ transzellulär und somit unter Beteiligung aktiver Prozesse resorbiert wird. Durch funktionelle Untersuchungen an isolierten Pansenepithelzellen konnten wir zeigen, daß die Mg2+-Aufnahme elektrodiffusiv, möglicherweise über einen Ionenkanal und über einen Anionen-gekoppelten Transportmechanismus erfolgt. Mg2+ wird wahrscheinlich zusammen mit CL- in die Zellen aufgenommen, während HCO3-sezerniert wird. Wie bei einer Vielzahl anderer Zellen (Herzmuskelzellen, Leberzellen, Erythrozyten, Thymozyten, Lymphozyten, Neuronen) wird der Mg2+-Efflux hauptsächlich durch einen Na+/Mg2+-Austauscher vermittelt. Im Rahmen einer Fortsetzung des Forschungsvorhabens soll nun erstmalig die Isolierung eines Mg2+-Transportsystems von Eukaryonten erfolgen. Da die Eigenschaften des Na+/Mg2+Austauschers am besten definiert sind, sollen zunächst monoklonale Antikörper gegen dieses Transportprotein erzeugt werden. Funktionale Antikörper, die den Mg2+-Efflux hemmen, sollen dazu verwendet werden, mit Hilfe von immunchemischen Methoden den Austauscher zu isolieren, zu charakterisieren und seine Expression an verschiedenen Zellen zu untersuchen. Zusätzlich ist geplant, die funktionellen Untersuchungen, insbesondere zur Regulation des Na+/Mg2+-Austauschers fortzuführen. Dies soll mit Hilfe fluoreszenzspektroskopischer und fluoreszenzmikroskopischer Untersuchungen an Mg2+-beladenen Erythrozyten, Herzmuskelzellen und Pansenepithelzellen geschehen.