Vorkommen, Regulation und transportphysiologische Bedeutung einer vakuolären H+-ATPase im Pansenepithel von Schaf und Rind

羊和牛瘤胃上皮液泡H-ATP酶的发生、调节和运输生理意义

• 批准号: 5454441
• 负责人: Privatdozentin Dr. Monika Röntgen
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Muskelbiologie und Wachstum
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2004-12-31 至 2011-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5454441?language=en
• 关键词: Vorkommen; Regulation; und; transportphysiologische; Bedeutung

Das geplante Forschungsvorhaben dient der Charakterisierung eines bei Pansenepithelzellen (PEZ) bisher nicht beschriebenen Transportproteins, der H+-ATPase vom vakuolären Typ (vH+-ATPase). Die Existenz einer vH+-ATPase bei diesem Zelltyp konnte in Vorversuchen mit verschiedenen Methoden (funktionelle Studien mit Hemmstoffen, Immunzytochemie, Western-Blot und RT-PCR) nachgewiesen werden. Im Rahmen des geplanten Forschungsvorhabens sind Experimente zur Aufklärung der Regulation dieser vH+-ATPase vorgesehen. Ferner soll ihre funktionelle Bedeutung im Zusammenhang mit dem Transport von Elektrolyten, bei der Ausbildung von chemischen und elektrischen Gradienten an der Plasmamembran sowie bei der Anpassung an wechselnde extrazelluläre Bedingungen definiert werden. Veränderungen der Expression bzw der Lokalisation der vH+-ATPase sollen mittels RT-PCR, Immunoblot und Immunozyto bzw. Immunohistochemie nachgewiesen werden. In funktionellen Studien werden fluoreszenzspektroskopische Methoden zur Bestimmung intrazellulärer Ionenkonzentrationen (Mg2+, Ca2+, Na+, H+) bzw. des Membranpotentials eingesetzt, sowie Messungen des Sauerstoffverbrauches im Mikrosystem durchgeführt.

植物的研究表明，泛上皮细胞（PEZ）的某些特性并不决定着细胞型H+-ATP酶（vH+-ATP酶）的转运蛋白。用免疫组织化学、Western-Blot和RT-PCR等方法检测Zelltyp中的vH+-ATP酶活性。在植物生长发育过程中进行了增强vH+-ATP酶活性调节的实验。在化学和电催化剂的辅助培养和等离子体膜的辅助下，通过电解质的输送，可以实现功能性的吸附，从而使吸附剂具有韦尔登。用RT-PCR、免疫印迹和免疫酶联免疫吸附法检测vH+-ATP酶的定位表达。免疫组化显示韦尔登。用韦尔登光谱法测定细胞内离子（Mg 2+，Ca 2+，Na+，H+）浓度。这些膜电位是通过微系统中的Sauerstoffverbrauches来测量的。