レ-ザ-顕微検査器の開発と薬物・情報伝達物質による細胞の応答・損傷の解析

激光显微镜的发展以及药物和信息传递器引起的细胞反应和损伤的分析

• 批准号: 02558027
• 负责人: 川戸 佳
• 金额: $ 10.75万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Developmental Scientific Research (B)
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 1992
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02558027/
• 关键词: 顕微検査器; パルスレ-ザ-; 薬物応答; 細胞損傷; 情報伝達物質; 発光顕微録画; 並進運動; 回転運動

昨年度に完成したレ-ザ-顕微蛍光検査器とレ-ザ-蛋白回転運動検査器を用いて、色々な細胞検査を行って興味ある結果を得た。副腎皮質細胞・肝臓細胞・表皮細胞を用いて核・ミトコンドリア・ミクロソ-ム・細胞膜を蛍光・燐光色素で選択的に標識した。これらの細胞に脳ペプチドホルモンACTHや精神安定剤クロプロマジンを添加して、これら標識した細胞内器官に対する効果を解析した。またこれら薬物の添加による、蛋白質・脂質の動的相互作用や、標識されたDNAの変動を解析した。(1)精神安定剤クロルプロマジンの添加すると、蛍光色素diphenylhexatrieneの蛍光偏光で見た細胞膜の脂質が急激に硬くなり、ethidium bromideの蛍光で見たDNAの形はゆるみ、その結果熱ショック蛋白の合成が誘導されることを発見した。またこの効果が低温15度では起こらず、37度で起こることも発見した。(2)脳ペプチドホルモンACTHを副腎細胞に添加すると以下のような応答が起こることを発見した。(a)差吸収スペクトルで見て副腎皮質細胞の細胞質からミトコンドリアにコレステロ-ルが移動して、蛋白質チトクロムP-450sccに結合する。(b)吸収偏光で見た蛋白質チトクロムP-450sccの運動の変化や、リン光偏光でみたアドレノドキシンの運動の変化から、3種類の蛋白チトクロムP-450scc・アドレノドキシン・還元酵素の相互作用が増すことが観測され、これらの蛋白間の電子伝達が促進されステロイドホルモン合成が上昇することを見いだした。

Last year, the results of cell analysis using a micro-optical detector and a micro-protein motion detector were obtained. Accessory kidney cortical cells, liver cells, and epidermal cells are used as the symbols of the nucleus, mitokondendria, mitokorosorum, cell membrane fluorescence, and phosphorescent pigments. The cells are labeled as ACTH, and the cells are labeled as ACTH. The analysis of protein and lipid interactions and DNA interactions (1)The addition of neuroleptic agents, the fluorescence of the pigment diphenylhexatriene, the fluorescence of the lipid membrane, the fluorescence of ethidium bromide, the formation of DNA, and the induction of protein synthesis as a result of this phenomenon have been reported. The temperature is 15 degrees Celsius, 37 degrees Celsius, and the temperature is 15 degrees Celsius. (2)The following is a summary of the results of the study: (a)Differential absorption of protein can be seen in the cytoplasm of adrenal cortical cells, and protein binding can be seen in the cytoplasm of adrenal cortical cells. (b)3 kinds of protein: P-450 scc, P-450

项目成果

H.Etter: ""Rotation and Interactions with Epoxide Hydrase of Cytochrome Pー450 in Proteoliposomes"" J.Biol.Chem. (1991)

H.Etter：“蛋白脂质体中细胞色素 P-450 的旋转及其与环氧化物水合酶的相互作用”J.Biol.Chem。

S.Kawato: "“Drug-induction Decreases the Mobility of Cytochrome P-450 in Rat Liver Microsomes:Protein Rotation Study"" J.Biochem. 109. 587-593 (1991)

S.Kawato：“药物诱导降低大鼠肝微粒体中细胞色素 P-450 的迁移率：蛋白质旋转研究”J.Biochem. 109. 587-593 (1991)

Y.Ohta: ""Cytochrome Pー450ーcontaining ProteinーProtein Interactions in Bovine Adrenocortical Mitochondria"" J.PharmacobioーDyn. 13. 112 (1990)

Y.Ohta：“牛肾上腺皮质线粒体中含有细胞色素 P-450 的蛋白质-蛋白质相互作用”，J.Pharmacobio-Dyn，13. 112 (1990)

Y.Ohta: "“Protein Rotation Study of Cytochrome P-450 in Subimitochondrial Particles:Effect of KCl and Intermolecular Interactions with Redox Partners"" J.Biochem. 109. 594-599 (1991)

Y.Ohta：“亚线粒体颗粒中细胞色素 P-450 的蛋白质旋转研究：KCl 的影响以及氧化还原伙伴的分子间相互作用”，J.Biochem. 109. 594-599 (1991)

H.Etter: "“Rotation and Interactions with Epoxide Hydrase of Cytochrome P-450 in Proteoliposomes"" J.Biol,Chem. 266. 18600-18605 (1991)

H.Etter：“蛋白脂质体中细胞色素 P-450 的旋转及其与环氧化物水合酶的相互作用”，J.Biol，Chem. 266. 18600-18605 (1991)