チトクロ-ムPー450を中心とした薬物代謝酵素遺伝子発現と化学発癌

以细胞色素P-450为中心的药物代谢酶基因表达与化学致癌作用

• 批准号: 03151005
• 负责人: 渡辺 民朗
• 金额: $ 14.08万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03151005/
• 关键词: チトクロ-ムPー450遺伝子; チトクロ-ムPー450cDNA; チトクロ-ムPー450蛋白; 癌原性化学物質の代謝; 転写調節蛋白; アセチルトランスフェラ-ゼ; グルタチオンSートランスフェラ-ゼ; ヒト遺伝子のRFLPs

1)P450遺伝子構造と誘導機構:ラットとハムスタ-P450IA1(ベンツピレン代謝)の5'上流域のDREとBTE領域の存在を確かめた。BTEに結合するBTEーBは転写調節因子Sp1と同じ結合性を持つ。DREと結合するリセプタ-蛋白は精製を試みているが成功していない。また培養肝細胞におけるベンツピレン代謝の誘導能は転写前と共に転写後の調節もある。2)P450遺伝子導入とその発現:ヒト胎児肝P450IIIA7をヒト乳癌由来細胞(MCFー7)、または昆虫由来細胞(Sf7)で、ヒトP450IIC9、IIC10、IIIA4を酵母で、イヌP450IA1をショウジョウバエに導入し、発現させた。そしてIIIA7、IIIA4はAFB_1代謝能、また、IIIA4とIA1はベンツピレン代謝能をもっていた。精製P450酵素の代謝特性:ヒト肝よりP450IIA6とIIIA4を精製し、それぞれクマリンの代謝と4,4'ーメチレンーbisー(2ークロロアニリン)の活性化能を示していた。また、ブニトロロ-ルの基質濃度により、触媒活性を示すP450IID2とIA1への依存性が異なっていることを確かめた。4)アセチルとグルタチオンのトランスフェラ-ゼについての検討:塩基配列の異なる2種のATcDNAを分取し、ATーBに遺伝子多型がある。また、GSTーmuがヒト食道癌で新たに発現していた。5)ヒトP450の遺伝子多型:P450IIE1(ジアルキルニトロサミン代謝)の制限酵素Dra1により遺伝子多型の分布において、癌患者と対称群の間で異なっており、その変異はイントロンVIにある。また、P450IA1のMsp1による多型は肺癌患者と対称群で有意差があり、ベンツピレン代謝活性の差異をもたらす、エクソン部位の変異の連鎖が確かめられた。特に、喫煙との関連が明らかである。

1)P450 gene structure and induction mechanism: RAT-P450IA1(RAT-P450IA1) DRE and BTE domain of 5'upper basin BTE binding BTE binding DRE binding protein purification process is successful. The induction of metabolism in cultured hepatocytes can be regulated before and after writing. 2)P450 gene introduction and development: fetal liver P450IIIA7 was introduced into breast cancer derived cells (MCF-7), insect derived cells (SF7), P450 IIC9, IIC10, IIIA4 were introduced into yeast, P450IA1 was introduced into breast cancer derived cells (SF7) and developed into yeast. 7, IIIA4, AFB1 Metabolizable Energy, 7, IIIA4, IA1 Metabolizable Energy Metabolic characteristics of purified P450 enzyme: P450IIA6 and IIIA4 are purified, and the activity of P450 IIA 6 and IIIA 4 is shown. P450 IID2 and IA1 are different depending on the substrate concentration and catalyst activity. 4) The analysis of ATcDNA of two species with different nucleotide sequences and ATB gene polymorphism. A new type of esophageal cancer has been discovered. 5) P450 gene polymorphism:P450 IIE1 (metabolism) and restriction enzyme Dra1 gene polymorphism distribution in cancer patients and in patients with different population groups. P450IA1 and Msp1 polymorphism in patients with lung cancer are linked to differences in metabolic activity and site diversity. Special, eat smoke and related.

项目成果

Uematsu,F.: "Association between restriction fragment length polymorphism of the human cytochrome P-450IIE1 gene and susceptibility to lung cancer." Jpn.J.Cancer Res.82. 254-256 (1991)

Uematsu,F.：“人细胞色素 P-450IIE1 基因的限制性片段长度多态性与肺癌易感性之间的关联。”

Hayashi,S-I.: "Genetic linkage of lung cancer-associated Msp I polumorphisms with amino acid replacement in the heme binding region of the human cytochrome P450 IA1 gene." J.Biochem.101. 407-411 (1991)

Hayashi,S-I.：“肺癌相关 Msp I 多态性与人细胞色素 P450 IA1 基因血红素结合区氨基酸替换的遗传联系。”

Satoh,K.: "Biochemical characteristics of preneoplastic marker enzyme glutathione S-transferase P-form (7-7)." Arch.Biochem.Biophys.285. 312-316 (1991)

Satoh,K.：“肿瘤前标记酶谷胱甘肽 S-转移酶 P 型 (7-7) 的生化特征。”

Tamai,K.: "Role of cystenine residues in the activity of rat glutathine transferase P (7-7):elucidation by oligonucleotide site-directed mutagenesis." Biochem.Biophys.Res.Commun.179. 790-797 (1991)

Tamai,K.：“半胱氨酸残基在大鼠谷胱甘肽转移酶 P (7-7) 活性中的作用：通过寡核苷酸定点诱变进行阐明。”

Shimada,T.: "Rat pulmonary microsomal cytochrome P-450 enzymes involved in the activation of procarcinogens." Biochem.Pharmacol.(1992)

Shimada,T.：“大鼠肺微粒体细胞色素 P-450 酶参与促癌物质的激活。”