オキシゲナ-ゼの生理機能に関する分子遺伝学的研究

加氧酶生理功能的分子遗传学研究

• 批准号: 03354015
• 负责人: 早石 修
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Osaka Bioscience Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Co-operative Research (B)
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03354015/
• 关键词: オキシゲナ-ゼ; 生理機能; 発現制御; 活性酸素; Pー450; 生理活性アミン; 分子遺伝学的研究

オキシゲナ-ゼの生理的機能とその発現制御の分子機構を解明するためには、すでに見いだされた各種オキシゲナ-ゼの分子構造と遺伝子構造を決定すると共に、その発現制御に関与するシスおよびトランスアクティング因子の単離同定や、オキシゲナ-ゼの細胞内局在化機構などの究明が必要である。1.ステロイドホルモンは、性ホルモンと副腎皮質ホルモンの2群に大別されるが、その生合成に関する6種類のモノオキシゲナ-ゼ(pー450)の反応機構に関してはまだ不明な点が多い。最近、石村、静田および岡本は、Pー450_<aldo>(or Pー450_<c18>)のクロ-ン化およびその反応機構を明らかにし、藤井は、先天性副腎過形成症をモデルとして患者遺伝子の解析を行ない、そのほとんどがPー450c_<21>に近接した偽遺伝子の欠陥変異によることを明らかにした。また、大村は、ミトコンドリアやミクロソ-ム型Pー450が、それぞれの細胞内器官へ指向するのは、アミノ末端のシグナル配列によることを明らかにした。2.生理活性アミンの生合成や代謝に関与するチロシン3ーモノオキシゲナ-ゼ、カテコ-ルジオキシゲナ-ゼやインド-ルアミンジオキシゲナ-ゼ遺伝子は、いずれも永津、野崎、吉田によりクロ-ン化され、永津は、ヒトチロシン3ーモノオキシゲナ-ゼ遺伝子を脳のカテコ-ルアミンニュ-ロンと副腎髄質で大量発現したトランスジェニックマウスの作製に成功し、野崎は、3種類のintradiol型ジオキシゲナ-ゼの遺伝子構造を明らかにし、その構造の比較から活性中心を推測した。吉田は、インド-ルアミンジオキシゲナ-ゼをstableに発現するtransformantを作製し、必須アミノ酸トリプトファンの枯渇による寄生虫の増殖抑制系を確立した。また、水上は、種々の病態に活性酸素が関与することに注目し、活性酸素を生成するNADPHオキシダ-ゼの活性化経路に関わる蛋白質の精製に成功し、その遺伝子のクロ-ニングに着手した。以上の如く、オキシゲナ-ゼの生理機能およびその発現制御機構の解明と、オキシゲナ-ゼが関与する先天性ホルモン合成異常症や各種アミン欠損症などの病態と病因を明らかにするための分子遺伝学的研究は、着実に成果を上げてきている。

オキシゲナ-ゼのphysiological function とその発existing control のmolecule mechanism を Explain するためには, すでに见いだされたVarious オキシゲナ-ゼのmolecule structure と缝子 Structure をdeterminationすると公に, その発正淣瀫关 and するシスおよびトランスアクティングfactorのIt is necessary to study the localization mechanism of the cells in single separation and determination. 1.Subject Category: Miscellaneousに关する6 kinds of のモノオキシゲナ-ゼ(pー450)のreaction mechanismに关してはまだUnknownな点が多い. Recently, Ishimura, Shizuta Okamoto, Pー450_<aldo>(or Pー450_<c18>)のクロ-ン化およびそのanti-reaction mechanism を明らかにし, Fujii は, patients with congenital adrenephropathy をモデルとしてそ子のanalyticsを行ない、そのほとんどがPー450c_<21 >に close contact し た pseudo legacy 伝子 の owed 陥変different に よ る こ と を 明 ら か に し た.また, Omura は, ミトコンドリアやミクロソ-ム type Pー450が, それぞれの cells The internal organs are pointed at the するのは, and the アミノ terminal のシグナルmatched arrangement によることを明らかにした. 2. Physiologically active biosynthetic and metabolic pathways and bioactivitiesノオキシゲナ-ゼ、カテコ-ルジオキシゲナ-ゼやインド-ルアミンジオキシゲナ-ゼ伝子は, いずれも Nagatsu, Nozaki, Yoshidaによりクロ-ン化され、永津は、ヒトチロシン3ーモノオキシAdjunct kidney materialでA large number of したトランスジェニックマウスのproduced successfullyし、野Saki は, 3 types of のintradiol type ジオキシゲナ-ゼの伝子 Structure を明らかにし, そのstructure のComparison からActive Centerを speculate した. Yoshida は、インド-ルアミンジオキシゲナ-ゼをstableに発成するtransform antをProduction and production, it is necessary to establish the system of inhibiting the proliferation of parasites by アミノ acid トリプトファンの渇による.また, water on the water, species 々の sick にactive acid がrelated and することにattention し, active acid をgeneration するNADPHオキシダ-ゼのActivated 経路に关わるproteinのrefinedにsuccessし,その缝子のクロ-ニングにstarted. The above explanations of physiological functions, オキシゲナ-ゼの およびその発, and オキシゲナ-ゼが关 are combined with congenital ホルモンResearch on the molecular genetics of various malformation disorders and various morbidities and causes of abnormality has been carried out, and the results have been published.

项目成果

Nonaka,Y.,Matsukawa,N.,Ying,Z.,Ogihara,T.,and Okamoto,M.: "Molecular Nature of Aldosterone Synthase,A Member of Cytochrome P-450_<11β> Family" Endocrine Res.17. 151-163 (1991)

Nonaka, Y.、Matsukawa, N.、Ying, Z.、Ogihara, T. 和 Okamoto, M.：“醛固酮合酶的分子性质，细胞色素 P-450_<11β> 家族成员”内分泌研究 17。 151-163 (1991)

Kuroiwa,T.,Sakaguchi,M.,Mihara,K.,and Omura,T.: "Systemic Analysis of Stop-Transfer Sequence for Microsomal Membrane" J.Biol.Chem.266. 9251-9255 (1991)

Kuroiwa,T.、Sakaguchi,M.、Mihara,K. 和 Omura,T.：“微粒体膜停止转移序列的系统分析”J.Biol.Chem.266。

Kawamoto,T.,Mitsuuchi,Y.,Toda,K.,Yokoyama,Y.,Miyahara,K.,Miura,S.,Ohnishi,T.,and Shizuta,Y.: "Role of Steroid 11β-hydroxylase (P-450_<11β>) and steroid 18-hysroxylase (P-450_<c18>) in the Biosynthesis of glucocorticoids and mineralocorticoids in Humans" P

Kawamoto, T.、Mitsuuchi, Y.、Toda, K.、Yokoyama, Y.、Miyahara, K.、Miura, S.、Ohnishi, T. 和 Shizuta, Y.：“类固醇 11β-羟化酶的作用 (P -450_<11β>)和类固醇18-羟化酶(P-450_<c18>)在人体糖皮质激素和盐皮质激素生物合成中的作用" P

Habara-Ohkubo,A.,Takikawa,O.,and Yoshida,R.: "Cloning and Expression of A cDNA Encoding Mouse Indoleamine 2,3Dioxygenase" Gene. 105. 221-227 (1991)

Habara-Ohkubo,A.、Takikawa,O. 和 Yoshida,R.：“编码小鼠吲哚胺 2,3 双加氧酶的 cDNA 的克隆和表达”基因。

Horiike,K.,Kobayashi,T.,Ishida,T.,and Nozaki,M.: "International Symposium on Oxygenases and Oxygen Activation" Yamada Science Foundation, 4 (1991)

Horiike,K.、Kobayashi,T.、Ishida,T.和Nozaki,M.：“国际氧化酶和氧活化研讨会”山田科学基金会，4（1991）