权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

脂資過酸化物耐性酵母の活性酵素消去系の解析

抗脂质过氧化酵母活性酶清除系统分析

基本信息

批准号：
03660112
负责人：
木村光
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03660112/
关键词：
グルタチオンペルオキシダ-ゼ脂質過酸化物 Hansenula mrakii 活性酸素

项目摘要

脂質過酸化物は管理不十分な食品中にしばしば発生し、食品の質の劣化を惹起する。また生体内においては、様々な生体成分に影響を与え、ガンなどの原因物質の可能性も指摘されている。本研究では、脂質過酸化物に対し耐性を示す酵母Hansenula mrakii IFO 0895株の耐性機構を解析し、本菌の活性酸素種からの生体防御機構について考察した。H.mrakii IFO 0895株は、リノ-ル酸ヒドロペルオキシドやtertーブチルヒドロペルオキシドなどの脂質過酸化物存在下で培養すると、グルタチオンペルオキシダ-ゼ(GPx)を誘導する。本酵素の細胞内分布を調べるため、オルガネラをショ糖密度勾配で分離した。その結果、本酵素は原形質膜に結合して存在することを明らかにした。更に、ミトコンドリア、もしくはペルオキシソ-ムにも本酵素活性が検出された。そこで、原形質膜に結合したGPxをLubrol PXで可溶化し、DEAEーsepharose,Blue Sepharoseカラムクロマトにより精製した。精製酵素はSDSーPAGEで分子量28,000の単一バンドを与えた。本酵素の基質特異性を検討した結果、H_2O_2には全く作用しなかった。H_2O_2に作用しないことから、グルタチオンSートランスフェラ-ゼ(GST)の可能性も示唆されたが、1ークロロ2,4ージニトロベンゼンをはじめその他のGSTの基質にも全く作用しないことから、本酵素はGPxと考えられた。更に本酵素は種々の脂肪酸ヒドロペルオキシドにも作用するほか、膜リン脂質の主要構成成分であるホスファチジルコリンヒドロペルオキシドにもよく作用した。ホスファチジルコリンヒドロペルオキシドに作用するGPxとしてはF.UrsiniらによってホスホリピドヒドロペルオキシドGPxが報告されているが、それらは細胞質画分から精製されており、本酵素は膜画分から得られている点で、大きく異なっている。以上の結果から、H.mrakiiのGPxは膜結合型の新規なGPxであると結論された。

Lipids are not well managed by acidizing compounds. Food products are not very hygienic, and food spoilage is caused by deterioration. In the body, the composition of the body is related to the composition of the body, and the cause of the disease is related to the possibility. In this study, the endurance of yeast Hansenula mrakii IFO 0895 strain was analyzed, and the biological defense mechanism of active acids in this strain was investigated. H.mrakii IFO 0895, tert, tert, acid, acid and acid. The intracellular distribution of this enzyme is similar to that of sugar density and isolation. The results showed that there was a significant difference in the binding of the enzyme to the original membrane. The activity of this enzyme is affected by the enzyme activity. The original membrane was combined with GPx resin Lubrol PX soluble gel, DEAESTER sepharose, and Blue Sepharose resin membranes. The molecular weight of the enzyme SDS PAGE is 28000. This enzyme has a specific effect on the results, and the H_2O_2 enzyme has a full effect on it. The possibility of H_2O_2 (GST) instigated the possibility of instigating the effect of the whole GST. The enzyme was tested by GPx. In addition, the main components of this enzyme, such as fatty acids, membranes, fatty acids, fatty acids, fatty acids The effects of GPx, F.Ursini, F.Ursini, GPx, cell, cell, enzyme, membrane, and membrane painting were analyzed. The results of the above results, H.mrakii GPx membrane combined with the new specification GPx performance analysis results.