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光圧力と静電力とを組合せたDNAのマイクロマニピュレ-ション

结合光学压力和静电力进行 DNA 显微操作

基本信息

批准号：
03650347
负责人：
水野彰
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Toyohashi University of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.光学系および電極の作成蛍光顕微鏡に下方よりYAGレ-ザを入射させ、焦点面に直径5μm程度のスポットを作り、光圧力を生じさせた。DNAの蛍光像は高感度SITカメラにて観察した。カメラの前にフィルタを入れ、レ-ザ光(パワ-500mW)は減衰させた。電極はスライドガラスに銅蒸着膜を作り、フォトレジストを用いて作成した。間隔100μmの平行電極系とし、80V,1MHzの高周波電圧を印加した。2.個別DNAの観察DAPI染色により入ファ-ジDNA(約50Kbp)を個々に観察できる。電圧を印加すると丸まっているDNAが伸長するので、これにより個々のDNAであることを確認した。3.個別DNAの選別操作まず、光圧力のみで個々のDNAを捕捉して輸送できるかどうかを調べたが、本実験条件下では不可能であった。しかし、電界が形成されている液体中にレ-ザを照射すると、レ-ザスポットに対し電界と直角方向から入り、平行な方向に出る流れ場が形成できることを見出した。この流れ場はスポット付近の半径10μm程度の局所において形成でき、その速度がレ-ザパワ-および電界強度で制御できるので、この流れ場を用い、一個のDNAを選別・輸送することに成功した。4.DNAの固定・観察用試料の作成直径10μmのタングステン線と、それに平行な蒸着電極を用い、間隔100μmにおいて80Vの高周波電界によりDNAを伸張させつつ、タングステン線を回転させることにより、DNAをタングステン線の表面に付着させることが可能であることを示した。

1. The optical system and the electrodes are made into optical micromirrors, and the optical pressure is generated by the optical micromirrors. DNA photoimaging is highly sensitive to SIT. Before the laser beam, the laser beam (-500mW) was reduced. The electrode is made of copper vapor. The parallel electrode system with a spacing of 100μm and a high frequency voltage of 80V,1MHz are available. 2. Detection of individual DNA by DAPI staining. Detection of individual DNA by DAPI staining. The DNA of the patient was elongated and confirmed. 3. Selection of individual DNA, light pressure and individual DNA capture and transportation are impossible under these conditions. The electric field is formed in the liquid. The electric field is formed in the direction of right angle and parallel direction. The flow field is close to the radius of 10μm, and the speed of the flow field is close to the electric field. 4. DNA immobilization and detection samples were prepared with a diameter of 10μm and parallel evaporation electrodes at intervals of 100μm and 80V in the high-frequency electric field.