バイオプラズマの創生

生物等离子体的产生

• 批准号: 19654088
• 负责人: 水野 彰
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Toyohashi University of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19654088/
• 关键词: 放電プラズマ; 誘電体バリア放電; λファージ; DNA; タンパク質; 不活化; 大腸菌; チオール基; 誘電泳動; 特異的結合

昨年度までの研究によって放電プラズマが生菌数の減少に寄与することを明らかにした。そこで今年度はこの解析をさらに詳細に進めた。ウイルス・細菌の不活化メカニズムは、放電空間内に発生する電位差による細胞壁の破壊や電流による細胞変性が考えられているが、推測の部分も多く、どの程度それぞれの要素が影響を与えているか未だ明らかにはなっていない。そこで不活化機構の解明に最も適した材料はDNA及びタンパク質のみで構成されるバクテリオファージであると考え、大気圧下での誘電体バリア放電を用いてλファージを検体とし、その不活化メカニズムの解析を行った。λファージはDNAとそれを取り囲むキャプシドと呼ばれるコートタンパク質からなっている。これにより生菌数の減少がタンパク質へのダメージによるものか、あるいはゲノムDNAへのダメージによるものかを明らかにすることを目指した。具体的には以下のような手順で実験を行った。まずλファージを誘電体バリア放電に曝露することによりコートタンパクおよびDNAに損傷を導入する。次にこれからDNAを抽出し、新しいコートタンパクでパッケージングする。このようにしてできたλファージはDNAのみに損傷を有していることになる。放電に曝露したλファージとそれを新しいコートタンパクでパッケージングしたものを大腸菌に感染させ、その感染能力を比較した。放電に曝露したλファージではプラズマへの曝露時間の増加に伴って感染能力が速やかに低下した。一方、放電に曝露したサンプルを新しいコートタンパクで再パッケージングした場合、放電への曝露量が小さい場合には感染能力がほぼ完全に放電プラズマに暴露していないものと同程度まで回復する結果となった。この結果は、この実験系では放電プラズマによるλファージの不活化に寄与する要因としてはコートタンパク質の損傷が支配的であるということを示唆している。

Yesterday's annual ま で の research に よ っ て discharge プ ラ ズ マ が raw count の reduce に send and す る こ と を Ming ら か に し た. Youdaoplaceholder0 そ で で this year そ に <s:1> analysis をさらに details に into めた. ウ イ ル ス の is not activated, bacteria メ カ ニ ズ ム は, discharge space に 発 raw す る potential difference に よ る の cell wall broken 壊 や current に よ る cell - が exam え ら れ て い る が part, conjecture の も く, ど の degree そ れ ぞ れ が の elements influence を and え て い る か not だ Ming ら か に は な っ て い な い. そ こ で not の activation agencies interpret に most も し た material は DNA and び タ ン パ ク qualitative の み で constitute さ れ る バ ク テ リ オ フ ァ ー ジ で あ る と え test, big 気 圧 under で の induced electricity body バ リ ア discharge を with い て lambda フ ァ ー ジ を 検 body と し, そ の inactive メ カ ニ ズ ム の parsing line を っ た. Lambda フ ァ ー ジ は DNA と そ れ を take り 囲 む キ ャ プ シ ド と shout ば れ る コ ー ト タ ン パ ク qualitative か ら な っ て い る. こ れ に よ り raw count の reduce が タ ン パ ク qualitative へ の ダ メ ー ジ に よ る も の か, あ る い は ゲ ノ ム DNA へ の ダ メ ー ジ に よ る も の か を Ming ら か に す る こ と を refers し た. The specific に に is followed by ような, で, を and った. ま ず lambda フ ァ ー ジ を induced electricity body バ リ ア discharge に exposure す る こ と に よ り コ ー ト タ ン パ ク お よ び に DNA damage を import す る. Time に こ れ か ら を DNA extraction し, new し い コ ー ト タ ン パ ク で パ ッ ケ ー ジ ン グ す る. こ の よ う に し て で き た lambda フ ァ ー ジ は DNA の み に damage を have し て い る こ と に な る. Discharge に exposure し た lambda フ ァ ー ジ と そ れ を new し い コ ー ト タ ン パ ク で パ ッ ケ ー ジ ン グ し た も の を coliform に infection さ せ, そ の infection ability を more し た. Discharge に exposure し た lambda フ ァ ー ジ で は プ ラ ズ マ へ の exposure time の raised に with っ て infection ability が speed や か に low し た. Side, discharge に exposure し た サ ン プ ル を new し い コ ー ト タ ン パ ク で again パ ッ ケ ー ジ ン グ し た occasions, discharge へ の exposure が small さ い occasions に は infection ability が ほ ぼ に completely discharge プ ラ ズ マ に exposed し て い な い も の と with degree ま reply で す る results と な っ た. こ の results は, こ の be 験 department で は discharge プ ラ ズ マ に よ る lambda フ ァ ー ジ の inactive に send す る by と し て は コ ー ト タ ン パ ク qualitative の damage が dominate で あ る と い う こ と を in stopping し て い る.

项目成果

States of Biological Components in Bacteria and Bacteriophages during Inactivation by Atmospheric Dielectric Barrier Discharges

• DOI: 10.1002/ppap.200800036
• 发表时间: 2008-08
• 期刊: Plasma Processes and Polymers
• 影响因子: 3.5
• 作者: H. Yasuda;Mai Hashimoto;M. Rahman;K. Takashima;A. Mizuno

Sterilization using a wide-gap discharge under atmospheric pressure

在大气压下使用宽间隙放电进行灭菌

• 发表时间: 2008
• 期刊: International Journal of Plasma Environmental Science and Technology 2
• 作者: I. Amano;Y. Tanino;K. Takastiima;A. Mizuno
• 通讯作者: A. Mizuno

大気圧放電プラズマによるウイルス不活化のメカニズム

常压放电等离子体灭活病毒的机理

• 发表时间: 2010
• 作者: 安田八郎;三浦卓也;栗田弘史;高島和則;水野彰
• 通讯作者: 水野彰

Biological Evaluation of DNA Damage in Bacteriophages Inactivated by Atmospheric Pressure Cold Plasma

• DOI: 10.1002/ppap.200900088
• 发表时间: 2010-03
• 期刊: Plasma Processes and Polymers
• 影响因子: 3.5
• 作者: H. Yasuda;T. Miura;H. Kurita;K. Takashima;A. Mizuno