Untersuchungen zum Einfluss der Xist-RNA Expression auf die Mikroarchitektur von Chromosomenterritorien in Stammzellen und differenzierten Zellen mittels 3D-Nanoskopie

使用 3D 纳米显微镜研究 Xist-RNA 表达对干细胞和分化细胞染色体区域微结构的影响

• 批准号: 132013847
• 负责人: Professor Dr. Thomas Cremer
• 金额: --
• 依托单位: Department of Biochemistry
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2008-12-31 至 2013-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/132013847?language=en
• 关键词: Untersuchungen; zum; Einfluss; der; Xist

Innovative nanoskopische Verfahren ermöglichen mit einer Auflösung unterhalb des Abbe Limits fluoreszenzmikroskopische Untersuchungen mit bislang unerreichter Genauigkeit. Wir wollen mittels optischer 3D-Nanoskopie die Chromatinarchitektur des aktiven und inaktiven X-Chromosoms vor und nach Xist-induzierter Inaktivierung in weiblichen embryonalen Stammzellen der Maus und in weiblichen induzierten pluripotenten Stammzellen von Maus und Mensch, sowie in daraus differenzierten somatischen Zelltypen untersuchen. Xist-RNA wird zur Initiierung der Inaktivierung benötigt, zur Aufrechterhaltung des inaktiven Status sind nachgeschaltete epigenetische Mechanismen (u. a. Histonmodifikationen) erforderlich. Unsere quantitativen Analysen zur subchromosomalen Faltungsstruktur beruhen auf der visuellen Darstellung von funktionell und physikalisch definierten Chromatinregionen, von Xist-RNA und relevanten Histonmodifikationen. Analog zu den Untersuchungen am X-Chromosom wird an einer embryonalen Stammzelllinie der Maus mit einem in ein Chromosom 11 integrierten Xist- Transgen die 3D-Mikroarchitektur vor und nach Xist-induzierter Inaktivierung dieses Chromosoms 11 untersucht und mit entsprechenden Veränderungen der inaktiven X-Chromosomen verglichen. Mit diesen Untersuchungen, die auch Vergleiche der Chromatinanordnung in Interphase und Mitose einschließen, wollen wir verschiedene Modelle, die für Strukturunterschiede zwischen aktiven und inaktiven X-Chromosomen vorgeschlagen wurden, testen und damit zu einem Verständnis der möglicherweise fundamentalen Bedeutung der Xist-RNA auf der strukturellen Ebene beitragen.

创新的Nanoskopische verfahrenermöglichenMitts einerauflösundunterhalb des abbe des abbe limited fluoreszenzenzmikroskopische untersuchung untersuchung bists bislang bislang unerreichter genauigkeit。 Wir wollen mitttels optischer 3D-Nanoskopie die Chromatinarchitektur des aktiven und inaktive X-Chromasoms vor und nach Xist-induzierter Inaktivierung in weiblichen embryonalen Stammellen der Maus und in weiblichen induzierten pluripotenten The unseen quantitative analysis of亚染色体faltungstrukturberühenauf der visellen darstellung von funktionell physikalisch definierten chromatinegionen，von xist-xist-rna und cessiponanten histonmodifikatikationen。 Analog zu den Untersuchungen am X-Chromosom wird an einer embryonalen Stammzelllinie der Maus mit einem in ein Chromosom 11 integrierten Xist- Transgen die 3D-Mikroarchitektur vor und nach Xist-induzierter Inaktivierung dieses Chromosoms 11 untersucht und mit entsprechenden Veränderungen der X-Cromosoms verglichen。 MIT Diesen，die auch auch vergleiche der chromatinanordnung在相间和有线线索einschließen中，沃伦模型，diefürstrukturunterschiede zwischen aaktien aaktien aaktien an aktien and an neaktive InAsktive dinake x-CromosomeMosomeMosomeMosomeMosomeMosomeMosomeMosomeMosomeMosomeGergerChlagen，验证了整个身体，均为整个身体， Beitragen。

项目成果

Application of Three-Dimensional Structured Illumination Microscopy in Cell Biology: Pitfalls and Practical Considerations

三维结构照明显微镜在细胞生物学中的应用：陷阱和实际考虑

• DOI: 10.1007/978-1-62703-983-3_8
• 发表时间: 2014
• 作者: Smeets D;Neumann J;Schermelleh L
• 通讯作者: Schermelleh L

Spatial separation of Xist RNA and polycomb proteins revealed by superresolution microscopy

• DOI: 10.1073/pnas.1312951111
• 发表时间: 2014-02-11
• 期刊: PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA
• 影响因子: 11.1
• 作者: Cerase, Andrea;Smeets, Daniel;Brockdorff, Neil
• 通讯作者: Brockdorff, Neil