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トランスジェニック・シロイヌナズナを用いた植物転写因子の機能解析

利用转基因拟南芥进行植物转录因子的功能分析

基本信息

批准号：
05854082
负责人：
三上浩司
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Okazaki National Research Institutes
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、コムギヒストン遺伝子の転写調節に関わるbZIP型転写因子HBP-1bの機能を、その解析に必要な遺伝学的実験方法の開発を行ないつつ明らかにしていくことを目的としている。その第一段階として、本年度では、コムギヒストンH3遺伝子がシロイヌナズナの植物体内でどのように発現するのかを調べ、計画した実験が可能かどうかを検討した。コムギヒストンH3遺伝子のプロモーター領域を、大腸菌グルクロニダーゼ(GUS)遺伝子のコード領域の上流につないだ。それをレポーター遺伝子として形質転換シロイヌナズナを作製し、異なる10個体以上の形質転換植物におけるGUS遺伝子の発現の様子を、発生段階をおって組織化学的に解析した。その結果、GUS遺伝子の発現が、すでに報告されているイネやコムギでのそれと同様のパターンを示した。このことから、単子葉植物であるコムギのヒストンH3遺伝子の発現制御機構を、双子葉植物であるシロイヌナズナを用いて解析できることが確かめられた。今後は、まず、bZIP型転写因子HBP-1bあるいはそのアンチセンスRNAを大量に発現させるためのエフェクター遺伝子の作製、及びそれを持つ形質転換シロイヌナズナの作製を行ない、エフェクター遺伝子の大量発現がシロイヌナズナの発生過程にどのように影響するのかを調べる。次に、レポーター遺伝子とエフェクター遺伝子を持つ形質転換シロイヌナズナの交配を行ない、HBP-1bあるいはそのアンチセンスRNAの大量発現が、植物体内でレポーター遺伝子の発現どのように影響するのかについて調べる。現在、エフェクター遺伝子の作製を行なっている。しかし、HBP-1bあるいはそのアンチセンスRNAの大量発現が大腸菌の生育にマイナスに働くためと思われるが、なかなか思うようには進んではおらず、さしあたりその克服に力を入れていく。

This study is aimed at the development of a new method for the functional analysis of the bZIP type factor HBP-1b, which is necessary for the regulation of the gene expression. In the first stage of this year, we will continue to study and plan for the development of H3 gene in plants. The upper part of the H3 gene field, the coliform gene field (GUS) gene field Histochemical analysis of the development of the GUS gene in plants with more than 10 individuals The results, the occurrence of GUS genes, and the presentation of the same information are reported. The development and control mechanism of monocotyledon and dicotyledon are analyzed in detail. In the future, HBP-1b, a ZIP type transcription factor, will affect the development of RNA in large quantities, including the production of DNA, and the production of DNA in large quantities. In addition, HBP-1b has a large number of RNA expression, and the expression of HBP-1b in plants is affected by the development of HBP-1b in plants. Now, we're going to have to do something about it. A large amount of RNA is produced in the reproduction of Escherichia coli, HBP-1b, HBP-1b and HBP-1b.