生体内カフェイン様物質サイクリックADPリボースの副腎髄質細胞における合成経路の存在とCa2^+動員作用

体内咖啡因样物质环ADP-核糖的合成途径及其在肾上腺髓质细胞中Ca2^+动员效应的存在

• 批准号: 05856057
• 负责人: 寺岡 宏樹
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Rakuno Gakuen University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05856057/
• 关键词: イノシトール3燐酸; カルシウムイオン; サイクリックADPリボース; 副腎髄質

1.副腎髄質におけるcADPR合成経路の存在.ウニ卵ホモジネートからのCa^<2+>放出を指標としてcADPR活性を測定した(後述)。ウシ副腎髄質ホモジネートとbeta-NADのインキュベート上清は、ラットの各臓器とともにcADPR活性を示した。alpha-NADでは活性は見られなかった。2.カテコールアミン分泌刺激によるcADPRの産生 アセチールコリン(100muM)はカテコールアミン分泌およびCa^<2+>放出の最大反応を起こしたが、ウニ卵ホモジネートからのCa^<2+>放出を指標とした時のcADPR活性は認められなかった。3.cADPRのCa^<2+>放出作用とその性質.副腎髄質ホモジネートは時間および温度依存性に^<45>Caを取り込んだ。^<45>Ca取込みはATP濃度依存性(0-1mM,ED50 0.5mM)であったが、ATP非存在下でも有意な取込みがあった。50muMまでのIP3およびcADPRは^<45>Ca取込みに顕著な影響を与えなかった。IP3やcADPRにより放出されるCa^<2+>量が取り込まれたもののごく一部であれば^<45>Caトレーサー法では検出されない可能性があるので、Fura2を用いて、ホモジネートから放出されるCa^<2+>放出を測定した。IP3は濃度依存性(10-20000nM,ED50 500nM)にCa^<2+>放出を起こし、その程度は負荷したCa^<2+>量に依存していた。IP3の効果はthapsigarginの前投与により消失し、ヘパリンにより濃度依存性(0-200mug/ml,IC50 10mug/ml)に抑制された。しかし、cADPRは1muMの高濃度でも全く影響を与えなかった。同様に、ラット大脳ホモジネートにおいても、IP3はCa^<2+>を放出させたが、cADPRは効果が見られなかった。一方、cADPRの作用が最初に報告されたウニ卵のホモジネートでは、同濃度のcADPRはCa^<2+>を放出させた。以上の成績より、ウシ副腎髄質にはbeta-NADをcADPRに変換する酵素は存在するが、アセチールコリンによりcADPRは産生されず、またcADPRにより作動するCa^<2+>放出系も存在しないことが示唆された。また、ラットの各臓器における成績を考慮すれば、cADPRが細胞内セカンドメッセンジャーとして哺乳類細胞内のCa^<2+>放出を制御している可能性は低いものと想像される。

1. The pathway of cADPR synthesis exists in pararenal plasma. Ca^<2+> emission index and cADPR activity were measured (described later). The activity of cADPR was detected in all organs of the kidney. alpha-NAD 2. The production of cADPR in response to stimulation of cADPR secretion (100muM) was the highest reaction of cADPR secretion and Ca ^<2 +> emission. 3. Ca^<2+> emission of cADPR and its properties. Time and temperature dependence of secondary kidney <45>function <45>Ca ~(2 +) concentration dependence on ATP (0-1mM, ED50 0.5 mM) was observed. In the absence of ATP, Ca ~(2 +) concentration was determined intentionally. 50muM<45>Ca ^&lt;2+&gt; emission from IP3 and cADPR was determined by <45>the Ca^&lt;2+&gt; emission method. IP3 is concentration-dependent (10-20000nM,ED50 500nM), Ca ^&lt;2 +&gt; emission is load-dependent. The effect of IP3 was inhibited by concentration dependence (0-200 ug/ml, IC50 10 ug/ml) of thapsigargin. High concentrations of cADPR and cADPR affect the whole body. The same is true for IP3 and Ca^&lt;2+&gt;. The effect of cADPR was initially reported to be the same as that of Ca^&lt;2+&gt;. The above results show that the enzyme beta-NAD is present in the para-kidney, and the enzyme cADPR is present in the para-kidney. The possibility of inhibiting Ca^2+&gt; emission in mammalian cells is low.

项目成果

Takio Kitazawa: "Characteristics of alpha_2-adrenoceptors in swine myometrium." Japanese Journal of Pharmacology. (in press).

Takio Kitazawa：“猪子宫肌层中 alpha_2-肾上腺素受体的特征。”

Hiroki Teraoka: "Various Ca^<2+> uptake mechanisms of the organella in bovine adrenal chromaffin cells." Japanese Journal of Pharmacology. (in press).

Hiroki Teraoka：“牛肾上腺嗜铬细胞细胞器的各种 Ca^2 摄取机制。”

Tetsuro Taneike: "Muscle layer and regional differences in autonomic innervation and responsiveness to transmitter agents in swine myometrium." Journal of Pharmacology. 14. 213-227 (1994)

Tetsuro Taneike：“猪子宫肌层自主神经支配和对递质剂反应的肌肉层和区域差异。”