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始原生殖細胞の増殖におけるチロシンキナーゼ型レセプターの役割

酪氨酸激酶型受体在原始生殖细胞增殖中的作用

基本信息

批准号：
05152009
负责人：
松居靖久
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

がん原遺伝子でチロシンキナーゼ型レセプターをコードするc-Kitと、そのリガンドのS1因子が、発生過程で起こる始原生殖細胞の増殖停止とテラトーマの発症にどの様に関与するかを調べるために、これらを過剰発現するトランスジェニックマウスを作ることを試みた。そのために、生殖細胞で特異的に発現するoct-3遺伝子のプロモーターにc-kitのcDNAを、生殖細胞やそのまわりの細胞などで発現するEF-1α遺伝子のプロモーターにS1因子cDNAをつないだキメラ遺伝子を作り、それぞれ受精卵に導入してトランスジェニックマウスを得た。現在これらのトランスジェニックマウスの生殖巣組織の観察と、始原生殖細胞の培養を試みている。また始原生殖細胞の増殖制御に関係する新しいチロシンキナーゼ型レセプター遺伝子のクローニングを試みた。EG細胞のmRNAを材料に、キナーゼの保存配列に対するプライマーを使ってRT-PCRを行い、EG細胞や生殖巣などで特異的に発現する4種類のキナーゼ遺伝子(GCK1、2、3、4)をクローニングした。このうちGCK1、2は新しいセリン/スレオニンキナーゼを、GCK3はPolo like kinaseをコードし、またGCK4はトリv-rykと相同性のあるタンパク質をコードする事がわかった。さらにGCK2はcDNAライブラリーから、ほぼ全長をコードする3.4KbのcDNAを得、その配列から非レセプター型のセリン/スレオニンキナーゼをコードすることが明らかになった。今後、これらの遺伝子産物と生殖細胞の増殖、分化やテラトーマの発症との関連を、トランスジェニックマウスと遺伝子ターゲッティング法により解析する予定である。

C-Kit, S1 factor and development process of protogerm cell are initiated. The growth and development of protogerm cell are related to the development of protogerm cell. The c-kit cDNA of the oct-3 gene, the c-kit cDNA of the germ cell, and the c-kit cDNA of the germ cell are specifically expressed in the germ cell. The c-kit cDNA of the EF-1 alpha gene is expressed in the germ cell. Now, the study of reproductive tissue and culture of primordial germ cells is carried out. The original germ cell reproduction control system is a new type of germ cell. EG cell mRNA material, protein, and preservation sequence are associated with RT-PCR, and EG cell reproduction is associated with four types of protein (GCK1, 2, 3, and 4). GCK1, GCK2, GCK3, GCK4, GCK4, GCK3, GCK4, GCK3, GCK4, GCK5, GCK6, GCK7, GCK8, GCK9, GCK9, GCK The full length cDNA of GCK2 is 3.4Kb and the sequence of GCK2 cDNA is 3.4Kb. In the future, the gene products and germ cell proliferation, differentiation and development of the relationship between the gene products and the genetic analysis