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マウス生殖細胞系譜決定の分子機構

小鼠种系测定的分子机制

基本信息

批准号：
12026245
负责人：
松居靖久
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Research Institute, Osaka Medical Center for Maternal and Child Health
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

次の世代のもとになる生殖細胞が、個体発生の過程で形成される機構は興味深いが、哺乳動物においてはあまり明らかになっていない。そこで、マウスの初期発生において、全能性幹細胞からなるエピブラストから始原生殖細胞が形成、分化する過程を制御する遺伝子を同定する目的で、次のように遺伝子スクリーニングを行った。まず、その遺伝子が欠損すると始原生殖細胞が全く形成されない、BMP-4遺伝子のノックアウトマウスと正常マウスを材料に、始原生殖細胞が形成される前の6.25日胚を使ったサブトラクションcDNAスクリーニングを行なった。得られた候補遺伝子の発現パターンをPCRおよびin situハイブリダイゼーション法により調べ、正常胚のエピブラストで特異的に発現する遺伝子の候補を得た。また、始原生殖細胞の前駆細胞や、その分化段階の初期から一貫して特異的に発現する遺伝子を同定し、さらにそういった遺伝子の中から、始原生殖細胞の形成および初期の分化に関わる遺伝子を単離することを試みた。これまでに作製した、始原生殖細胞で蛍光タンパク質であるGFPを発現するOct-3/4 GFPトランスジェニックマウスから、単離可能ななるべく早い時期の、移動期始原生殖細胞を純化した。次にそのようにして得た細胞と、全能性幹細胞を含む胚盤胞との間でサブトラクションcDNAスクリーニングを試み、候補遺伝子を得た。さらにそれらの発現パターンを同様に調べ、移動期および生殖隆起内の始原生殖細胞で発現しているが、全能性幹細胞や体細胞組織では発現しない遺伝子を見いだした。今後、これらの遺伝子の始原生殖細胞形成に対する機能を遺伝子ターゲッテングにより明らかにする。

In the next generation, reproductive cells and individual babies are born in the process of forming a deep taste in the body, and the animals in the mammal are very sensitive to the disease. In the early stages of the disease, the baby was born, the totipotent cell, the cell, the primordial reproductive cell, the progenitor cell, the primordial reproductive cell, the progenitor cell, the primordial reproductive cell, the progenitor cell, the primordial reproductive cell, the primordial reproductive The primordial reproductive cells were completely formed, the BMP-4 cells were formed, the normal reproductive cells were formed, and the primordial reproductive cells were formed on the 6.25th day before the embryo was formed. You need to know that you have to PCR your child, in situ your child, and your normal embryo. You can get your baby to get it. In the early stages of differentiation, in the early stages of differentiation and in the formation of primordial reproductive cells. The primary reproductive cycle may be induced in the early stage, and the original reproductive cycle will be activated in the early stage of the migration phase. The primary reproductive cycle will be activated in the early stage, and the initial reproductive cycle will be activated in the early stage of the GFP. The secondary and functional cells contain germ cells, embryo cells, cDNA cells and waiting cells. During the period of migration, the primordial reproductive cells in the reproductive eminence and the tissue tissue of the totipotent progenitor cells in the reproductive eminence of the migratory phase can be detected by the tissue structure of the cells. From now on, the primordial reproductive cells are formed at the beginning of the baby, and the mechanism can be used to tell the truth.