トランスジェニックマウス発がん個体において有効な免疫遺伝子治療法開発のための基礎的研究

开发致癌转基因小鼠有效免疫基因疗法的基础研究

• 批准号: 05152055
• 负责人: 中島 泉
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05152055/
• 关键词: トランスジェニックマウス; がん遺伝子ret; 腫瘍免疫; TNFレセプター; 免疫遺伝子治療

プレBリンホーマ好発Eμ/retがん遺伝子トランスジェニックマウス(TGM)系を、遺伝子の伝達をPCR法で確認しつつ継代維持し、増殖させて実験を行い、以下の成果を得た。1.Eμ/ret TGM発生腫瘍に同種遺伝子を導入して異物化したプレBリンホーマ細胞を用いて同系BCF_1マウスを免疫し、移植腫瘍を拒絶する免疫が誘導された。このマウスには抗腫瘍キラー細胞と抗体活性が検出されたが、その特異性を検討した結果、retがん遺伝子産物に特異的であることが判明した。2.TGMに生後1ヶ月以降、異物化腫瘍細胞を反復免疫したところ、TGMの腫瘍発生が抑えられ、生存日数が有意に延長した。また、非免疫対照TGM 12例が全例174日以前に死亡したのに対して、免疫群11例ではこの時点で70%以上が生存し、かつ2例では肉眼的にも顕微鏡観察においても腫瘍発生を認めなかった。3.ret遺伝子産物特異免疫の標的となるret遺伝子産物の性状を明らかにしてより良い免疫方法を確立するため、マウスproto-ret遺伝子cDNAを分離し、その塩基配列を決定した。この結果、マウスとヒトのproto-ret遺伝子の配列には80%のホモロジーがあることが判明した。この結果を利用してがん免疫の標的ペプチドの解明とそのワクチン開発への利用を進める予定である。4.TNFレセプター(TNFR55,TNFR75)遺伝子をレトロウイルスヴェクターに組み入れてPA317細胞に導入、ウイルス産生性細胞株を樹立した。また、この細胞株が産生するウイルスを細胞株に導入してTNFレセプターを発現させることに成功した。この系を用いてTGM発生腫瘍の治療実験を計画している。

The following results were obtained by PCR method for identification of TGM system and TGM gene. 1. T. subsp. 1-T. subsp. 2-T. subsp. 1-T. The results of this study indicate that the activity of anti-tumor cells and anti-tumor antibodies is very high. 2. The number of days of TGM survival was intentionally prolonged after 1 month of TGM survival. 12 cases of TGM died before 174 days, 11 cases of TGM died before 174 days, 11 cases of TGM died before 174 days, 12 cases of TGM died before 174 days, 11 cases of TGM died before 174 days, and 2 cases of TGM died before 174 days. 3. To establish a method for specific immunization of gene products, isolate gene fragments and determine gene sequences. The results show that 80% of the proto-ret sequences are identical. The result is that the target of immunity is not available. 4. TNFR55, TNFR75 gene expression vector was introduced into PA317 cells and established into PA317 cell line. The cell line was successfully introduced into the cell line. This is the first time that TGM has been used in the treatment of tumors.