心筋症ハムスター(Bio14.6)心筋膜異常の細胞骨格系タンパク質からの解明

从细胞骨架蛋白阐明心肌病仓鼠 (Bio14.6) 的心肌膜异常

• 批准号: 05770039
• 负责人: 岩田 裕子
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: National Cardiovascular Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770039/
• 关键词: 心筋症; 心筋症ハムスター; ジストロフィン; 細胞骨格系タンパク質; 膜異常; ジストロフィン結合タンパク質; 免疫沈降; 免疫蛍光染色

今年度の研究により,心筋症発症前のBio14.6心筋における膜機能蛋白質の膜分画への回収異常として探知される膜異常には,細胞膜裏打ち構造保持に関与する細胞骨格系タンパク質の異常が関与することが明らかにされた.特にジストロフィンにおいては、Bio14.6心筋ホモジェネートでは、対照ハムスター心筋含有量の約50%にもかかわらずミクロゾーム分画に対照の4倍以上回収されるという異常が検知され、両ハムスターでジストロフィンの細胞内分布には異常ないことから膜とジストロフィンとのassociationにBio14.6心筋では何らかの異常が存在すると結論された。そこでウサギ骨格筋において膜とジストロフィンとのassociationに関与するということで既にその存在が知られているジストロフィン結合糖蛋白質(43,50,150K,DAP)異常の有無を検討した。対照に比しBio14.6心筋ホモジェネートにおいて、43K DAP量の60%減少さらに50K,150K量の著しい(80-90%)減少が認められた。さらに,WGAビーズまたはジストロフィン抗体ビーズを用いた実験より,ジギトニン存在下に対照ハムスター心筋ジストロフィンは、50K,43K,150K DAP等との複合体として部分精製されるが、Bio14.6心筋ジストロフィンは各アフィニティービーズで上記3種の糖蛋白とは離れて回収されることを見いだした。正常細胞ではジストロフィンと同様,50K,43K DAPは細胞膜及びT管膜に存在したが,Bio14.6心筋の50K DAPは細胞膜に検出できなかった。しかし50K DAP以外の細胞内局在は両ハムスター間で大きな差はなかった。以上今年度の成果より心筋症ハムスター心筋壊死の一因としてジストロフィン結合蛋白質50K DAPの細胞膜欠損によるジストロフィン-DAP複合体形成異常の存在が示唆された。

Our の research に よ り, before the disease of heart muscle disease 発 の Bio14.6 heart muscle に お け る の membrane function of membrane protein points draw へ の 収 back abnormal と し て ascertain さ れ る membrane abnormal に は, playing ち in the cell membrane structure keep に masato and す る cells bone is タ ン パ ク quality abnormal の が masato and す る こ と が Ming ら か に さ れ た. Special に ジ ス ト ロ フ ィ ン に お い て は, Bio14.6 heart muscle ホ モ ジ ェ ネ ー ト で は, polices according to ハ ム ス タ ー amount of heart muscle contains about 50% に の も か か わ ら ず ミ ク ロ ゾ ー ム points draw に polices according to の more than four times back 収 さ れ る と い う abnormal が 検 know さ れ, struck ハ ム ス タ ー で ジ ス ト ロ フ ィ ン の intracellular distribution に は abnormal な い こ と か ら Membrane と ジ ス ト ロ フ ィ ン と の association に Bio14.6 heart muscle で は what ら か の anomalies が exist す る と conclusion さ れ た. そ こ で ウ サ ギ skeletal muscle に お い て membrane と ジ ス ト ロ フ ィ ン と の association に masato and す る と い う こ と で both に そ の exist が ら れ て い る ジ ス ト ロ フ ィ ン combining sugar protein (43,50,150 K, DAP) abnormal の presence of を beg し 検 た. As seaborne に than し Bio14.6 heart muscle ホ モ ジ ェ ネ ー ト に お い て, 43 k DAP の 60% reduce さ ら に 50 k, 150 k amount の the し い (80-90%) decrease が recognize め ら れ た. さ ら に, WGA ビ ー ズ ま た は ジ ス ト ロ フ ィ ン antibody ビ ー ズ を with い た be 験 よ り, ジ ギ ト ニ ン presence に polices according to ハ ム ス タ ー heart muscle ジ ス ト ロ フ ィ ン は, 50 k, 43 k, 150 k DAP etc と の complex と し て part refined さ れ る が, Bio14.6 heart muscle ジ ス ト ロ フ ィ ン は each ア フ ィ ニ テ ィ ー ビ ー ズ で written three の glycoprotein と は from れ て back 収 さ れ る こ と を see い だ し た. Normal cells で は ジ ス ト ロ フ ィ ン と with others, 50 k, 43 k DAP は cell membranes and び T tube membrane に exist し た が, Bio14.6 heart muscle の 50 k DAP は membrane に 検 out で き な か っ た. Outside of 50K DAP, the <s:1> intracellular <s:1> is a で large <s:1> な difference で な った った った. All above our の よ り heart muscle disease ハ ム ス タ ー heart muscle 壊 の death due to と し て ジ ス ト ロ フ ィ ン binding protein 50 k DAP の owe cell membrane damage に よ る ジ ス ト ロ フ ィ ン - DAP complex formation exist abnormal の が sucking さ れ た.

项目成果

岩田 裕子: "Defective association of dystrophin with salcolemmal glycoprotein in the cardio myopathic hamster heart" FEBS Lett.329. 227-231 (1993)

Yuko Iwata：“心肌病仓鼠心脏中肌营养不良蛋白与鞍膜糖蛋白的缺陷关联”FEBS Lett.327-231 (1993)。

岩田 裕子: "Altered membrane-dystrophin association in the cardiomyopathic hamster heart" Biochem.Biophys.Res.Commun.190. 589-595 (1993)

Yuko Iwata：“心肌病仓鼠心脏中膜-肌营养不良蛋白关联的改变”Biochem.Biophys.Res.Commun.190（1993）。

岩田 裕子: "正常及び心筋症ハムスター心筋における膜イオン輸送タンパク質の細胞内分布の比較検討" 心筋の構造と代謝. 15. 47-53 (1993)

Yuko Iwata：“正常和心肌病仓鼠心肌中膜离子转运蛋白的细胞内分布的比较研究”心肌结构和代谢。15. 47-53 (1993)。

岩田 裕子: "心筋症ハムスター(Bio14.6)心筋におけるジストロフィン結合蛋白質の異常" 心筋の構造と代謝. 16. (1994)

Yuko Iwata：“心肌病仓鼠心肌中抗肌营养不良蛋白结合蛋白的异常（Bio14.6）”心肌结构和代谢16。（1994）。